葡萄霜霉菌效应因子PvRxLR4功能分析

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mingxing020
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
葡萄霜霉病是葡萄上一种重要的病害,在我国各个葡萄产地都有分布。葡萄霜霉病是由葡萄霜霉病[Plasmopara viticola(Berk.&MA.Curtis)Berl.&De Toni]引起的。该菌能够分泌一些效应因子进入植物的胞内来抑制免疫反应。本研究中PvRxLR4效应因子的基因序列由本实验室对葡萄霜霉菌菌株离体萌发孢子的转录组测序中预测到的。PvRxLR4是能够激发本氏烟草叶片细胞死亡的效应因子之一。通过对PvRxLR4的定位、缺失和点突变体进行功能分析,为阐明葡萄霜霉菌的致病机理提供依据。结果如下:1.葡萄霜霉菌PvRxLR4效应因子的基因序列全长750bp,N端有一个信号肽序列、一个Rx LR保守结构域和一个糖基化位点。PvRxLR4在葡萄霜霉菌侵染欧洲葡萄‘黑比诺’(Vitis vinifera cv.Piont Noir)早期高表达。2.瞬时转化本氏烟草,PvRxLR4能够引起烟草叶片细胞死亡。亚细胞定位在烟草原生质体的细胞质和细胞核上。细胞质的定位和PvRxLR4的C端在引起烟草细胞死亡的过程中发挥着重要的作用。N端的信号肽序列可能使葡萄霜霉菌将效应因子PvRxLR4分泌到胞外而表现出对烟草叶片细胞的无毒性。瞬时转化葡萄霜霉菌效应因子PvRxLR4能够激发烟草抗病防御反应,并且这一功能也依赖于细胞质的定位。3.利用病毒介导的基因沉默(Virus-mediated gene silencing;VIGS)方法证明引起烟草叶片细胞死亡依赖于SGT1和MAPK级联反应中的MEK2。4.对转基因烟草接种辣椒疫霉后不同时期的烟草叶片进行q RT-PCR分析MEK2、SGT1、PAD4、PR1b、Rboh B的表达,发现PvRxLR4可能通过调节MAPK级联反应中的MEK2来增强抗病基因SGT1、SA信号通路相关基因和活性氧相关基因的表达来提高植物的抗病性。
其他文献
为了揭示套作大蒜消减番茄连作障碍的作用和化感机理,课题组前期鉴定出大蒜化感物质二烯丙基二硫(DADS),结合转录组测序分析,从‘东粉3号’番茄中筛选出一个响应DADS的主效基因SlDIR1-like。在此基础上,本研究通过构建过表达载体、RNAi载体和CRISPR/Cas9介导的基因敲除载体,利用农杆菌介导法转入番茄Micro-Tom(Solanum lycopersicum cv.Micro-T
学位
里氏木霉(Trichoderma reesei)在基因打靶时的频率很低,通常只有不到10%,这使得在里氏木霉中进行基因改造相对困难。之前解决里氏木霉同源重组率低的方法是通过敲除非同源末端修复途径(NHEJ)中的相关修复基因ku70,来提高外源基因的打靶效率。然而敲除这些重要的修复基因可能会导致基因组不稳定和自发突变的累积,因此在不破坏NHEJ途径的条件下利用RNAi沉默里氏木霉NHEJ途径相关基因
学位
细胞壁和表皮毛既是植物的重要的组成部分,同时也具有很高的经济和药用价值。表皮毛位于植物的最外层,是由表皮细胞发育而来的特化结构。它可以帮助植物抵抗生物及非生物因素对其的伤害,此外,有些表皮毛的分泌物是合成多种香料和杀虫剂的原材料。为了寻找控制表皮毛发育的新基因,早期在实验室构建的表皮毛突变体库筛选到一个表皮毛发育异常突变体,命名为M12-07,并通过图位克隆和测序手段确定了表皮毛突变体M12-07
学位
小麦条锈病是由条形柄锈菌Puccinia striiformis f.sp.tritici引起的重要流行病害,发生范围广,危害严重,一般流行年份,会造成小麦10~30%的产量损失,严重时甚至绝收。该病害主要由条锈菌夏孢子随气流传播。陇南属于小麦条锈病常发流行区,是我国小麦条锈菌的主要越夏地之一,能够向我国东部麦区传播菌源,具有至关重要的战略地位。2018年3月至2019年3月,我们对陇南的小麦条锈
学位
类钙调磷酸酶B互作蛋白激酶(calcineurin B-like interacting protein kinase,CIPK)是植物中广泛存在的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,与上游CBL(calcineurin B-like protein)蛋白结合,形成CBL-CIPK复合物,在钙信号的传递过程中发挥重要作用,而钙信号作为细胞内存在第二信使,在调控植物生长、发育以及非生物与生物逆境等信号通路中
学位
马铃薯是世界上第四大粮食作物,在我国的种植面积和产量均居世界第一。但由卵菌致病疫霉菌(Phytophthora infestans)引起的马铃薯晚疫病(Potato late blight)严重影响到马铃薯的生产。因此,研究致病疫霉菌致病机理将为防控晚疫病做出理论指导。致病疫霉菌在侵染植物的过程中分泌一类功能多样且数量庞大的RXLR效应蛋白,进入植物细胞内。这些效应蛋白调控寄主植物的生理反应,并与
学位
植物细胞核基因的正确表达保证了叶绿体的正常发育,是叶绿体有效进行光合作用的保障。本研究通过筛选var6-1一系列的逆转突变体,并分别克隆相应的突变基因,发现这些基因产物都是真核生物剪接体中的重要功能蛋白。剪接体蛋白在真核生物中高度保守,随着其不断进行组装,激活,解聚的循环来介导pre-mRNA的剪接。本论文对筛选到的一系列抑制突变体进行研究后到底了以下结论:(1)对筛选到的var6-1逆转突变体S
学位
微生物在烟叶醇化过程中扮演着十分重要的角色,利用微生物醇化烟草,能显著提高卷烟香气质量,减少青杂气和刺激味,使烟气饱满醇和,余味纯净舒适。本研究利用环秦岭地区安康旬阳、汉中南郑、商洛洛南三地的新鲜烟叶、烤烟烟叶及根际土壤,经过初步分离微生物,根据微生物对于淀粉、果胶、纤维素、木聚糖、蛋白质及N-亚硝胺等物质的降解能力进行初步筛选,用分离的微生物醇化烟草,由专业评吸人员进行感官评价后,结合气相色谱-
学位
葡萄是全球重要的经济水果之一,其中栽培最广泛的欧洲葡萄品质优良、营养价值高,但是生产中受到葡萄白粉病的严重危害。因此,开展葡萄抗白粉病相关基因功能的研究,对揭示葡萄抗白粉病机理、培育抗病品种具有重要意义。2013年之后,基因组编辑技术快速发展,特别是CRISPR/Cas9技术,相比传统的育种途径,基因组编辑技术能对目标基因直接进行修饰,可以提高修饰目标性状的精准度、加快育种进程。本研究拟利用CRI
学位
网翅叶蝉族(Opsiini)隶属半翅目Hemiptera头喙亚目Auchenorrhyncha叶蝉科Cicadellidae角顶叶蝉亚科Deltocephalinae,由Emeljanov在1962年基于雄性生殖器具有双阳茎干和成对的阳茎孔建立,在澳洲区、古北区、非洲区及东洋区均有分布,世界已知38属337种,中国分布14属65种(包括本研究已发表种类)。许多种类不但直接取食危害,而且传播植物病原
学位