冬虫夏草作为传统中药材自15世纪起就广为人知,并在亚洲国家广泛应用。经现在药理科学研究发现,冬虫夏草含有许多有价值的药用成分。仅青藏高原等高海拔地区才有冬虫夏草。众所周知,不同产地来源、产收季节、药用部位等因素都对中药材品质影响巨大。因此,本文选取青海和西藏两个不同产地的冬虫夏草作为研究对象,从冬虫夏草中核苷类和虫草素含量、重金属含量和存在的化学形态、不同产地冬虫夏草对四氯化碳(Carbon Tetrachloride,CCL4)所致大鼠肝损伤的保护作用、不同产地冬虫夏草对庆大霉素诱导的大鼠肾损伤的保护作用、不同产地冬虫夏草增强小鼠免疫功能五个方面来考察比较这两个不同产地冬虫夏草的药理作用。【目的】研究冬虫夏草中铅、砷、汞、镉四种重金属存在形态,可为冬虫夏草中重金属的毒性和机体吸收程度等进一步研究提供参考依据。同时,考察青海和西藏两个不同产地冬虫夏草中核苷类、虫草素的含量和重金属含量的差异,对CCL4所致大鼠肝损伤和庆大霉素建立的肾损伤模型的保护作用以及对C57BL/6小鼠免疫功能的影响,综合比较评价这两个产地冬虫夏草的质量,选出品质更为优良的产地,为冬虫夏草原药材的选择和进一步开发研究提供科学依据。【方法】通过高效液相法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)分析冬虫夏草中核苷类和虫草素的含量。对于重金属的含量测定,铅、镉均是采用原子吸收分光光度法,砷采用氢化物原子荧光光度法,汞采用原子荧光光谱分析法。采用化学试剂逐步提取法结合原子吸收及原子荧光法分析研究冬虫夏草中铅、砷、汞、镉的化学形态及其含量。然后,将大鼠分为空白组,模型组,青海和西藏冬虫夏草低、中、高剂量组,共8个组,分别建立CCL4诱导的急性肝损伤模型和硫酸庆大霉素诱导的急性肾损伤模型,研究两个不同产地冬虫夏草对大鼠急性肝损伤和肾损伤的保护作用。最后,以C57BL/6小鼠为研究对象,考察两个不同产地冬虫夏草对小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能和NK细胞活性的影响。【结果】高效液相色谱法可以同时测定冬虫夏草中腺苷、尿苷、鸟苷、肌苷、尿嘧啶和虫草素的含量,四种重金属铅、镉、砷、汞含量分别是西藏:0.076,0.061,0.38,0.0062mg·kg-1;青海:0.46,0.079,5.9,0.24 mg·kg-1。化学形态分析结果表明Pb以盐酸提取态为主;As主要以残渣形式存在,其次是乙醇提取态和去离子水提取态;Hg基本为残渣态;Cd含量很低,且主要是氯化钠提取态。与模型组相比,两个不同产地冬虫夏草低、中、高三个剂量组均能显著降低大鼠血清AST、ALT水平,升高肝组织匀浆SOD、GSH水平(P<0.05),改善肝细胞坏死程度,但两个不同产地间的差异并不显著(P>0.05)。与之类似,青海、西藏两个产地给药组与模型组相比,尿量明显减少,NAG酶活性和尿总蛋白显著降低,血肌酐与尿素氮的含量也明显下降,且肾组织病理学形态明显好于模型组。但这两个产地给药组之间相比,各项指标无显著性差异。此外,两个不同产地冬虫夏草高、中剂量组均能显著提高ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖和碳廓清能力,腹腔巨噬细胞吞噬荧光微球能力以及NK细胞的活性,且与正常对照组相比,差异具有显著性(P<0.05);两个产地中剂量组均能明显增加小鼠抗体生成细胞数,但高剂量组反而出现抑制现象(P<0.05);青海中、高剂量组显著提高小鼠迟发型变态反应(Delayed type hypersensitivity,DTH)程度,而西藏冬虫夏草无明显作用,且青海高剂量组与西藏三个剂量组间存在显著性差异(P<0.05);青海中、高剂量组及西藏中剂量组能明显提高小鼠血清溶血素水平(P<0.05),且这两个产地对应中、高剂量组间存在显著性差异(P<0.05)。【结论】冬虫夏草中核苷类和虫草素的含量、四种重金属含量和主要存在形态都有很大的差异。青海和西藏两个不同产地冬虫夏草对CCL4所致大鼠急性肝损伤和庆大霉素引起的急性肾损伤均有一定的保护作用;与对照组相比,均能明显提高小鼠的免疫力,但两者之间的药理作用效果相当,无显著性差异。