目前,检测DNA甲基化的方法有多种:甲基化敏感内切酶法,PCR测序法等因操作繁琐,敏感性低很难用于临床.1998年建立的甲基化特异性PCR方法(methylation specific PCR/MSP法)在检测肿瘤相关基因甲基化过程中具有操作简单,灵敏性高的优点,成为目前有关甲基化研究的主要方法.该研究分为三个部分:第一部分我们通过甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)对结肠癌、肺癌及其正常组织中p16基因启动子区CpG岛的甲基化状况进行了检测.发现在癌组织中有较为广泛的p16基因启动子区CpG岛甲基化现象.第二部分我们用脱甲基化试剂5-氮杂脱氧胞苷对四种肿瘤细胞株(T24、HepG2、SPC-A1、BIU-87)进行了处理,通过RT-PCR检测了肿瘤细胞株中p16基因mRNA在处理前后表达的差异.发现除BIU-87存在p16基因缺失外,其余三种细胞株p16基因mRNA的表达水平在处理前后确实存在显著性差异第三部分我们通过免疫组化检测了四种肿瘤细胞株中P16蛋白在用5-氮杂脱氧胞苷处理前后表达水平的差异.发现除BIU-87中P16蛋白不表达外,其余三种细胞株的p16基因蛋白的表达水平在处理前后也存在显著性差异.通过以上实验说明了在肿瘤组织和肿瘤细胞株中p16基因启动子区CpG岛甲基化是一较普遍现象.通过对p16基因甲基化的研究,对阐明肿瘤发生的分子机制有重要的作用.