【摘 要】
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【目的】本课题旨在探究桩蛋白（paxillin,PXN）与乳腺癌抗雌激素耐药蛋白（brest cancer anti-estrogen resistance 1,p130Cas/BCAR1）在恶性黑色素瘤（malignant melanoma,MM）中的表达情况及意义,并对两者之间可能的相互作用机制进行初步探讨。【方法】1、选取恶性黑色素瘤80例,皮内痣（intradermal nevus）30例
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【目的】本课题旨在探究桩蛋白（paxillin,PXN）与乳腺癌抗雌激素耐药蛋白（brest cancer anti-estrogen resistance 1,p130Cas/BCAR1）在恶性黑色素瘤（malignant melanoma,MM）中的表达情况及意义,并对两者之间可能的相互作用机制进行初步探讨。【方法】1、选取恶性黑色素瘤80例,皮内痣（intradermal nevus）30例行paxillin与p130Cas免疫组化染色,对比paxillin与p130Cas两种蛋白在上述不同样本中的表达情况,并分析与恶性黑色素瘤患者临床病理学特征的关系以及paxillin与p130Cas蛋白在MM组织中表达的相关性;2、选取近3年（2017-2019年）恶性黑色素瘤病例30例与8例皮内痣病例行Q-PCR检测,进一步观察paxillin与p130Cas两种基因在恶性黑色素瘤组织与皮内痣组织中相对表达情况;3、构建paxillin与p130Cas干扰RNA,在A375人恶性黑色素瘤细胞中进行转染,通过WB验证干扰效果;4、构建anti-paxillin与anti-p130Cas,将A375细胞株分成A组与B组,A组敲除paxillin的表达,B组敲除p130Cas的表达,并通过WB和Q-PCR分别验证对paxillin与p130Cas的干扰效果。【结果】1、paxillin和p130Cas蛋白在MM组织中表达阳性率均比皮内痣组织中高,且两种蛋白表达均与MM患者性别、转移（包括淋巴结转移与结外转移）、病理分期相关（P<0.05）;且两种蛋白在MM中表达呈正相关（P<0.01）;2、Rt-PCR结果显示paxillin mRNA和p130Cas mRNA较之皮内痣组,恶性黑色素瘤组多数呈不同程度相对高表达（P<0.05）;3、siRNA干扰效果试验显示:siRNA对paxillin及p130Cas抑制效果显著（P<0.05）;4、siRNA干扰抑制试验显示:敲除paxillin基因后,paxillin蛋白及mRNA表达量均显著下降（P<0.05）,而p130Cas蛋白及mRNA表达量均无明显变化;敲除p130Cas基因后,paxillin及p130Cas蛋白及mRNA表达量均显著下降（P<0.05）。【结论】paxillin与p130Cas在恶性黑色素瘤组织中均具有一定程度的高表达,paxillin与p130Cas的表达均与患者的年龄、转移情况、病理分期相关;paxillin与p130Cas两种蛋白在MM组织中的阳性表达率呈显著正相关;paxillin与p130Cas两者之间存在相互作用的关系,并且p130Cas基因位于paxillin的上游。paxillin与p130Cas可作为恶性黑色素瘤鉴别诊断的依据,且提供其分子靶向治疗的理论依据。
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