淫羊藿素抑制肝癌HepG2细胞增殖机制初步研究

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肝癌是全世界最常见癌症之一,中国是肝癌的重灾区,中国肝癌人数及死亡率均居世界之首,研究肝癌治疗手段和药物对于中国来说意义重大。淫羊藿历来就是传统中药中的一味补益药材,历代本草中皆有记载,主要有坚筋骨、补肾阳、强心力等药用价值。淫羊藿素是淫羊藿中的一种活性成分。淫羊藿素具有心血管保护、促进骨质形成、调节人体免疫力等功能外,还具有抑癌作用,但是对于淫羊藿素抑癌的机理研究却非常少,其抗癌作用机制尚未完全揭示。本文以人肝癌HepG2细胞为研究材料,应用流式细胞检测、RT-PCR、Westernblot等方法研究淫羊藿素对HepG2细胞的增殖影响,主要研究结果包括以下几个方面:(1)淫羊藿素有效抑制肝癌HepG2细胞增殖,并且抑制能力呈现剂量和时间依赖性。通过MTT实验表明,淫羊藿素能够显著抑制HepG2细胞的增殖,且药物浓度越高、作用时间越长,其抑制作用越强。(2)淫羊藿素对HepG2细胞S期进行阻滞。通过不同浓度梯度的淫羊藿素处理肝癌HepG2细胞24h后,运用流式细胞仪检测细胞周期情况,随着药物浓度的增加表现出明显的S期阻滞。RT-PCR结果表明S期关键基因cyclin A和CDK2在转录水平上的表达明显减弱,并表现出明显的药物剂量依赖性,与流式检测周期结果相吻合,证明淫羊藿素能够将细胞周期阻滞在S期。Westernblot检测p53和p21的表达,表明淫羊藿素有促进肿瘤细胞凋亡的效果。(3)淫羊藿素抑制HepG2细胞增殖的途径为抑制JAK2/STAT3信号通路的过度活化。采用RT-PCR和Western blot检测不同浓度淫羊藿素处理24h后的HepG2细胞中JAK2和STAT3的mRNA水平及p-JAK2和p-STAT3的表达水平。实验表明处理后的肿瘤细胞中JAK2和STAT3的mRNA水平明显下降,p-JAK2和p-STAT3的表达明显降低,说明淫羊藿素能有效降低肿瘤细胞中JAK2/STAT3信号通路的过度活化。从上述结果表明,淫羊藿素有着显著的抗癌效果,为抗肝癌药物的研发提供了一种新的思路。
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