下呼吸道细菌感染在各科临床中十分常见，并与多种疾病相互共存，是许多疾病的死因之一。目前诊断致病菌的方法，主要是依靠常规细菌培养。常规细菌培养周期长，受感染类型和抗生素应用的影响大，细菌培养阳性率较低，特别是苛养菌。这些均造成了目前临床致病菌检测效率低，抗生素使用不合理，耐药菌不断增加，给临床诊断和治疗造成困难的局面。 本实验综合探针反相杂交技术和基因芯片检测的基本原理，并加以改进和创新，建立了16SrDNA序列基础上的微生物基因同步检测技术，并合作研制了相配套的小型工作平台，便于该技术的推广应用。 实验中首先在16SrDNA序列基础上设计了通用引物、通用探针和特异探针，并检测了通用引物的广谱性、通用引物PCR扩增的灵敏度、通用探针的广谱性和特异探针的特异性，证实这些引物和探针符合本实验的需要。 其次我们进行了PCR条件和探针杂交条件的优化，以进一步提高探针杂交的灵敏度和特异性。 最后我们收集了107份社区获得性肺炎和161份医院获得性肺炎的痰样品和血清样品，比较普通痰培养、血清学检测、单纯PCR检测、探针杂交检测的结果，发现探针杂交检测技术的灵敏度和特异性高于前3种方法，并且在苛养菌的检测方面具有一定的优势，可以弥补现有临床检测方法的不足。 总之，基因诊断技术是临床微生物检测的发展趋势，本实验也初步证实了基因诊断具有较高的灵敏度和特异性，适合临床检测的推广。