钙调神经磷酸酶依赖的信号通路在哮喘发病中的作用

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哮喘引起气道重塑的发病机制迄今尚未完全阐明.钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)是体内唯一的Ca<2+>/钙调素依赖的丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,介导Ca<2+>依赖的细胞增殖、肥大、凋亡、分泌等多种功能的信号通路.该工作在正常大鼠的脑、心、肺等组织中,应用Westernblot及免疫组织化学方法研究CaN催化亚单位α亚型(CaAα)在各组织中的蛋白含量及分布,并用<32>P标记的底物肽测定各组织的CaN活性;以诱导气道粘液分泌的活性肽鸟苷素为靶点,在离体肺组织孵育中,用放免法测定CaN在乙酰胆碱(Ach)刺激的肺组织合成和释放鸟苷素中的作用;在哮喘豚鼠模型上,研究CaN在哮喘气道平滑肌增殖中的作用;在离体培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)上,采用<3>H-TdR参入法,研究CaN在已知的促丝裂剂血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和近年新发现的活性肽尾加压素Ⅱ(UⅡ)诱导的ASMC增殖中的作用;在离体培养的大鼠肺成纤维细胞上,用<3>H-TdR参入和<3>H-脯氨酸参入法,研究CaN在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的增殖和胶原全盛与分泌中的作用;在此基础上,研究CaN与蛋白激酶A(PKA)、蛋白激酶C(PKC)和丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)之间的相互交联(cross-talk).
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