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背景:由于耐药性的存在,通过化疗途径治疗胰腺癌的效果受到了很大的影响。如果我们能够估测到化疗药物在治疗胰腺癌中的有效性,从而达到逆转化疗耐药作用的目的,这也成为我们研究化疗治疗胰腺癌的重中之重。micro RNA(mi RNA)已被证明广泛参与各种肿瘤细胞的耐药产生,且mi RNA由于其自身的很多特点在疾病诊治方面具有突出优势。但是截至目前,在研究胰腺癌化疗耐药方面,涉及mi RNA的很少。本论文从鉴定胰腺癌耐药相关mi RNA着手,在胰腺癌细胞5-Fu耐药株中,发现mi R-21表达显著上调,并且通过mi R-21的过表达作用,在提升胰腺癌相关细胞对5-Fu的敏感度方面效果十分显著,细胞增殖和侵袭能力也得到很大提升。在比较初步的临床调查中,结果显示mi R-21的表达水平和胰腺癌患者化疗后的生存期是负相关的。目的:研究mi R-21在胰腺癌5-Fu耐药过程中的作用及具体分子机制,以改善胰腺癌5-Fu化疗耐药的现状。方法:胰腺癌细胞对5-Fu的反应性和耐受性用IC50值表示。利用实时定量PCR(real-time PCR)筛选与胰腺癌5-Fu耐药相关的mi RNA,针对这些mi RNA的mature序列设计引物,以探究mi R-21在耐.药细胞株和相应亲,本细胞株间的表达,差,异。随后构建过表达mi R-21的慢病毒表达载体,进而感染目的细胞PANC-1和PATU8988,检测mi R-21的过表达。用划痕实验和transwell实,验检。测胰腺癌细胞的侵袭能力。进一步用、invasion实验检测胰腺癌细胞的迁移能力。用western blot实验检测靶基因的表达变化。同时过表达靶基因和mi R-21,以检测靶基因对mi R-21促耐药作用的对抗效果,验证mi R-21促耐药的作用机制。结果:与亲本株PATU8988相比,耐药细胞株PATU8988/5-Fu中mi R-21的表达显著上调。在胰腺癌细胞系PATU8988和PANC-1中由慢病毒介导mi R-21的过表达,不仅导致两种胰腺癌细胞系PATU8988和PANC-1对化疗药物5-FU的耐受,也同时促进了胰腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移。通过更进一步的机制探索,发现mi R-21促进耐药是通过抑制靶基因PTEN和PDCD4的表达。而增强PTEN和PDCD4的表达可以减缓由mi R-21引起的5-Fu耐药作用,并相应减缓胰腺癌细胞的侵袭。结论:1.mi R-21促进胰腺癌细胞对5-FU的耐受性;2.mi R-21通过调控靶基因PTEN和PDCD4的表达而发挥促耐药作用。3.作为mi R-21的靶基因,PTEN和PDCD4过表达可以减缓由mi R-21导致的5-FU耐受性及其相关表型。