显微镜观察药物敏感度检测技术在结核病快速诊断中的应用及评价

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目的:1.通过比较显微镜观察药物敏感度检测技术(microscopic observation drug-suscetpibility assay,MODS)、萋-尼抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法直接检测痰标本中结核分枝杆菌,评价其在肺结核诊断中的应用价值。2.通过比较显微镜观察药物敏感度检测技术(microscopic observation drug-suscetpibility assay,MODS)、萋-尼抗酸染色法和改良罗氏培养基培养法检测胸腔积液、脑脊液标本中的结核分枝杆菌,评价其对结核性胸膜炎、结核性脑膜炎(肺外结核)的诊断价值。方法:1.肺结核组:采用24孔细胞培养板液体培养方法建立MODS.收集肺结核临床疑似患者的痰标本264份和非肺结核患者痰标本20份,分别采用萋-尼抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法以及显微镜观察药物敏感度检测技术进行Mtb检测,观察3种方法痰标本中检出Mtb的情况;对改良罗氏培养法和MODS技术培养获得的分枝杆菌采用免疫层析法鉴定。对MODS法检测的肺结核临床确诊患者和MODS法检测结果为阴性的患者均为期90d的临床随访,由专科医师在此基础上作出临床诊断,再以该临床诊断为标准,比较分析3种方法的检测性能,评价MODS技术在肺结核诊断中的应用价值。2.肺外结核组:采用24孔细胞培养板液体培养方法建立MODS.收集肺外结核疑似患者的标本共173份,其中结核性胸膜炎疑似患者的胸腔积液标本112份、结核性脑膜炎疑似患者的脑脊液标本61份和非结核病患者胸腔积液和脑脊液标本18份,分别采用萋-尼抗酸染色法、改良罗氏培养基培养法和MODS技术进行结核分枝杆菌检测。对改良罗氏培养法和MODS技术培养获得的分枝杆菌采用免疫层析法鉴定。对MODS法检测的肺结核临床确诊患者和MODS法检测结果为阴性的患者均为期90d的临床随访,由专科医师在此基础上作出临床诊断,再以该临床诊断为标准,数据比较采用卡方检验,通过比较分析3种方法的检测性能,评价MODS技术对肺外结核的诊断价值。结果:1.肺结核组:3种方法检出20份非结核病患者痰标本均为阴性;264份肺结核临床疑似患者的痰标本,萋-尼抗酸染色法的阳性检出率为28.8%、改良L-J培养法为36.0%、MODS技术为42.8%,其中102份萋-尼抗酸染色法和(或)改良L-J培养法阳性的痰标本中,MODS检出97份,达95.1%;在162份萋-尼抗酸染色法和改良L-J培养均为阴性的痰标本中,MODS检出阳性16份;若以临床诊断为标准,MODS、改良L-J培养法及萋-尼抗酸染色法的敏感度和特异度依次分别为63.4%和97.8%、54.3%和100.0%、43.3%和100.0%,三者敏感性差异具有统计学意义(P<0.01);MODS阳性检出时间中位数为10d,明显短于改良L-J培养法的25d.2.肺外结核组:萋-尼抗酸染色法、改良罗氏培养法和MODS检测出结核性胸膜炎的阳性率依次分别为1.3%(1/78)、6.4%(5/78)和20.5%(16/78);检测结核性脑膜炎的阳性率依次分别为3.1%(1/32)、18.8%(6/32)和37.5%(12/32)。所有改良罗氏培养法和MODS检测出的分枝杆菌均是结核分枝杆菌。在结核性胸膜炎和结核性脑膜炎的阳性率检测中,MODS的检出率均高于改良罗氏培养法,其差异具有统计学意义(P<0.01)。3种方法检测18份非结核病患者的胸腔积液和脑脊液结果均为阴性。MODS检测胸腔积液和脑脊液标本的阳性检测时间的中位数分别为14d和9d,明显比改良罗氏培养法所需要的31d短。结论:MODS技术与传统病原学检测方法相比较,具有敏感性好、检出时间短的优势,适用于结核病临床快速诊断。
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