苯酚对铜绿微囊藻生长的影响及铜绿微囊藻酸性多糖的分离与结构、功能研究

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本实验以铜绿微囊藻(Microcystic aeruginosa)为研究材料,分两部分进行。第一部分主要研究了模拟太湖水域春、夏季温度条件下,不同浓度的苯酚对铜绿微囊藻生长的影响,实验结果表明:正常水体中铜绿微囊藻在夏季(30℃)比春秋季节(22℃)生长快。浓度低于200μg/ml的苯酚对它的生长有促进作用,而浓度高于400μg/ml的苯酚则明显抑制其生长,高浓度苯酚胁迫下的铜绿微囊藻细胞光合速率,可溶性蛋白含量下降;细胞膜透性增大;超氧阴离子(O2-)和丙二醛(MDA)相对含量升高;超氧化物歧化酶(SOD)活性降低,藻细胞自发荧光较对照减弱。表明铜绿微囊藻更适合于夏季高温条件下生长,且较高浓度苯酚对其有较强抑制作用,在铜绿微囊藻细胞生长势强时这种抑制作用更明显。 第二部分主要研究铜绿微囊藻酸性多糖的分离纯化、结构分析和生物学活性。铜绿微囊藻经过热水提取,减压浓缩,酒精沉淀,脱蛋白,乙醚、丙酮洗涤,真空干燥,得到铜绿微囊藻粗多糖,经DEAE-52纤维素柱分离纯化得到铜绿微囊藻酸性多糖纯品(MAAP)。通过理化分析及IR、UV、HPLC,13C—NMR等方法分析其性质和化学结构。并通过研究MAAP对体外超氧阴离子(O2?)和对体内移植性S-180腹水瘤细胞的作用,来研究MAAP的免疫功能和抑制肿瘤作用。结果显示:铜绿微囊藻酸性多糖为均一组分,重均分子量为2.0028×105,糖苷键类型为α型吡喃糖,由D-鼠李糖,D-木糖,L-阿拉伯糖,D-半乳糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为1.514:1.457:1.0:0.189:0.583。生物学活性实验显示:浓度小于18μg/ml的MAAP样品对超氧阴离子的清除作用随MAAP浓度增加而增加,呈正相关(R2=0.9885)。在浓度为18μg/ml时清除率达到最高,为48.6%。浓度超过18μg/ml之后MAAP样品对超氧阴离子的清除作用随其浓度增加而下降。在通过接种S-180成功建立的小鼠肿硕士学位论文摘要瘤模型实验中发现,MAAP对S一180引起的小鼠体重减轻、胸腺、脾脏等免疫器官萎缩有明显的保护作用。高剂量治疗组(ZOOmg/Kg.d)、低剂量治疗组(80mg/K g.d)小鼠红细胞及心、肝、脑、肾等器官MDA下降,SOD升高,血液红细胞及肝脏的GSH含量升高,且各项指标高剂量治疗组与模型组均达到显著差异。表明在一定范围内,MAAP具有提高机体免疫力,抗氧化、抗衰老及抑制体内肿瘤的作用。
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