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目的:观察内脏高敏感性SD幼鼠海马水平超极化激活环核苷酸通道-2(Hyperpolarization-activated cyclic nucleotide,HCN)的表达情况,探讨幼鼠海马HCN2蛋白在内脏痛痛觉敏化形成中的作用,为儿童腹痛相关的功能性胃肠病的防治提供理论依据。方法:按照新生期有无结直肠刺激(Colorectal irritation,CI)和幼鼠期有无接受结直肠扩张(Colorectal distension,CRD)的2×2析因设计方法,将44只新生鼠随机分为4组,每组11只(分别为CI+CRD组、CI组、CRD组和对照组)。CI组和CI+CRD组新生大鼠出生后第8~14天,每天予60mm Hg压力下结直肠刺激建立内脏高敏感模型,CRD组和对照组大鼠新生期不予任何处理;CRD组和CI+CRD组大鼠在42日龄时接受CRD刺激。CI组、对照组幼鼠于45日龄进行Morris水迷宫实验,包括定位航行实验和空间探索实验,共6天。实验结束后将四组幼鼠处死取材海马,并采用SABC免疫组织化学法检测幼鼠海马HCN2阳性细胞数和Western blot方法检测各组幼鼠海马HCN2蛋白。采用SPSS 17.0软件进行数据分析,α=0.05为显著性检验标准。结果:在CRD为40mm Hg、60mm Hg时,CI+CRD组幼鼠AWR评分均值明显高于CRD组,两组差异具有统计学意义(P<0.05),CI+CRD组、CRD组幼鼠痛阈均值分别为(18.18±2.52)mm Hg、(37.42±5.13)mm Hg。Morris水迷宫定位航行试验中,同一日CI组和对照组幼鼠潜伏期均值相比,两组差异无统计学意义(P>0.05);空间探索实验,CI组和对照组“原平台所在象限游泳路程/总路程”和“原平台穿越时间/总时间”和“穿越原平台次数”相比,两组差别同样无统计学意义(P>0.05)。CI+CRD组、CI组、CRD组及对照组幼鼠海马CA1区HCN2阳性细胞数百分比分别为33.38%、24.25%、13.06%、7.94%;CI组与对照组、CI+CRD与对照组、CRD组与对照组、CI+CRD组和CRD组、CI组和CRD组幼鼠间海马CA1区HCN2阳性细胞数百分比差异均具有统计学意义(P<0.05),CI+CRD组与CI组间差异无统计学意义(P=0.156);析因设计分析结果显示:新生期CI建立幼鼠内脏痛高敏感模型与幼鼠期接受CRD均可使幼鼠海马CA1区HCN2阳性细胞数百分比增加(P<0.05),且两因素间不存在交互作用;Western blot实验结果显示:幼鼠海马HCN2蛋白表达量CI+CRD组>CI组>CRD组>对照组,且CI+CRD组与对照组,CI组与对照组间比较具有统计学意义(P<0.05),CRD组与对照组间比较无统计学意义(P>0.05)。结论:采用新生期反复结直肠刺激所建立的内脏痛觉高敏感模型幼鼠海马HCN2蛋白出现高表达,提示新生期CI导致幼鼠内脏痛高敏感性与海马HCN2蛋白高表达有关;另该方法所建立的慢性内脏痛高敏感性幼鼠的空间记忆能力无明显损害,可提示HCN2蛋白在内脏痛幼鼠海马高表达与空间记忆能力损害无关。