提取分离黄连须中生物碱及其药代动力学研究

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本文取材重庆石柱黄连副产物黄连须。前期研究表明黄连须中生物碱含量达到黄连的1/3,而市场调查显示黄连须价格每公斤是黄连的1/15。随着黄连中生物碱的药理作用越来越广泛被关注,尤其现有很多关于黄连生物碱降血糖、降血脂,降血压、抗肿瘤等研究。因此,开发黄连须成本低,取材方便,医药价值大,前景广阔。本文研究了黄连须中生物碱的提取条件和工艺;然后用各种树脂对黄连须提取液进分离纯化;最后研究了黄连生物碱在小鼠体内的代谢及药代动力学。具体结果如下:1.黄连生物碱的提取工艺优化对实验室已有黄连须根的各种提取方法通过实验进行验证,选出成本低、效果好的提取方法,并对提取条件进行优化。最后确定黄连须总生物碱提取条件是0.3%的硫酸水浸泡,加热回流提取。2.黄连须提取液的分离试验选取不同树脂和吸附剂对提取液进行吸附试验,最后确定弱酸性阳离子树脂D152吸附效果较好,吸附量大。优化吸附参数,用石灰乳将提取液中pH中和的5-6,吸附效果最好。3.黄连生物碱的纯化试验对吸附在D152树脂柱上的黄连总生物碱洗脱、收集、检测。用一定浓度NaOH溶液洗脱树脂柱,能够洗脱药根碱单体;用一定硫酸浓度的甲醇(70%)溶液能够洗脱剩余全部生物碱。用不同浓度的NaCl进行盐析,能够得到小糪碱单体和总生物碱。4.黄连生物碱的代谢选取多种添加剂和总黄连生物碱混合配置成试验药物,进行代谢试验。能通过给小鼠灌胃,检测小鼠粪便中黄连总生物碱的残余量多少,筛选出最大促进黄连总生物碱吸收量的助剂;数据用统计学处理方法。5.黄连生物碱的药代动力学研究将实验中选出的最优助剂加入黄连总生物碱,给小鼠灌胃,通过各时间段对小鼠眼眶取血,用HPLC检测小鼠血药浓度,从而了解药物在小鼠体内的药代动力学参数。
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