两种新型制御剂对费氏弧菌Lux群体感应系统抑制效果研究

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群体感应是细菌用于通过对菌体密度的感知而调控基因表达的机制。群体感应的细菌通过产生并释放一种被称为autoinducer的信号分子,这种信号分子的浓度会随着细菌菌体密度的增加而增加。当信号分子的浓度达到或超过最低浓度极限时,就可以引发基因表达。在环境治理过程中,细菌的作用举足轻重。一方面,我们可以通过削弱环境中病原菌致病力的方法达到净化环境的目的,另一方面又能够利用细菌降解污染物的能力,进行环境生物治理。因此,深入研究群体感应对细菌各种表现型的调控能够更好的发挥环境治理过程中细菌的作用,有着重要的实际意义。费氏弧菌(Vibrio fischeri)是群体感应最初被发现并描述的菌体,也是迄今为止研究最为透彻的菌体。尽管现在知道的菌株中每个群体感应系统都不完全一样,但费氏弧菌的发光系统还是被认定为群体感应系统的代表。所以尽管费氏弧菌本身不是病原体,但寻找它的群体感应抑制剂却具有非常重要的指导意义。费氏弧菌属于弧菌的一种,弧菌是一个包含了几十种或益或害的寄生在海洋动物组织的水生嘎玛变形菌门。费氏弧菌或游离于海水中或作为共生体存在于一些海洋鱼类或鱿鱼的发光器官中使这些生物能发光。费氏弧菌能够发光是lux操纵子的表达引起的。这个操纵系统已经被证明在生物工艺学中具有非常广泛的用途。事实上,许多革兰氏阴性菌利用群体感应系统调控菌体毒力因子的表达、胞外酶的分泌、胶质、鼠李糖酶和生物联的形成。因此,制御群体感应机制为控制病菌传染提供了一个新策略。在这次的研究中,我们测试了3种不同种类的化合物对转移到大肠杆菌中的费氏弧菌Lux群体感应系统的制御效果。第一,我们证实了天然制御济卤化呋喃也可以制御Lux群体感应系统。第二,我们合成了酰基链中所含碳原子个数从4到11的一系列酰基盐酸环戊醇乙胺酯(N-acyl cyclopentylamide,Cn-CPA)并测试了它们对Lux群体感应的制御效果。我们发现,所有这些分子都有不同程度的制御作用。其中酰基链中含有5到10个碳原子的C5-CPA、C6-CPA、C7-CPA、C8-CPA、C9-CPA、C10-CPA是非常有效的抑制剂。最有效的C6-CPA、C7-CPA、C8-CPA在最终浓度为100μM时对发光的制御效果可以达到或超过90%。我们还比较了卤化呋喃和C6-CPA(最有效的抑制剂之一)的制御效果。结果表明C6-CPA的要比卤化呋喃更加有效。第三,我们发现α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精也可以制御Lux群体感应系统,其中最有效的是γ-环糊精。并对环糊精制御群体感应的机理进行了分析,发现除了侧链和环的半径之外还有其他因素可能影响其对信号分子包接能力的强弱。以上的所有研究为有效削弱环境中革兰氏阴性病原菌的致病性提供了很好的依据,同时也为环境生物治理的研究提供了新的思路和方法。
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