本文分别以交联壳聚糖微球、AB-8型大孔吸附树脂和硅藻土为载体,分别采用戊二醛交联和物理吸附的方式,研究β-葡萄糖苷酶的固定化工艺,以提高固定化酶比活和酶活回收率,并尝试应用上述固定化酶和苹果籽催化合成正丁基-葡萄糖苷。主要研究内容及结果如下:1.以壳聚糖微球为载体,通过戊二醛交联固定化β-葡萄糖苷酶。以固定化酶比活和酶活回收率为目标,单因素分析优化微球的制备工艺、交联条件和固定化工艺。壳聚糖微球最佳制备工艺为:壳聚糖终浓度2.5%,乙酸终浓度0.33%,NaOH溶液与乙醇配比为1:1,NaOH终浓度3.13%,采用中和法制得壳聚糖微球。交联条件为:0.1g壳聚糖微球,20mL 3%戊二醛,50℃下交联2h(150rpm)。最佳固定化工艺为:加酶量7338mU/g干球,150rpm振荡吸附25℃,24h。固定化酶比活为6188mU/g,酶活回收率高达95.4%。2.以AB-8型大孔吸附树脂为载体,通过物理吸附的方法固定化β-葡萄糖苷酶。单因素分析考察加酶量、温度、转速和吸附时间对固定化效果的影响。最佳固定化工艺为:0.8g AB-8型树脂,加酶量为5000mU/g树脂,30℃,225rpm下振荡吸附24h。固定化酶比活为11049mU/g树脂,酶活回收率达到93.7%。硅藻土未能固定化β-葡萄糖苷酶。3.应用壳聚糖微球固定化酶催化葡萄糖和正丁醇合成正丁基-葡萄糖苷。用薄层色谱跟踪反应,通过LC-MS初步分析,新出现四种化合物,可能作为载体的壳聚糖也参与了合成反应。应用苹果籽催化合成反应,实验条件下没有出现产物。以AB-8型树脂固定化酶催化合成反应,分析产物的红外谱图和LC-MS质谱,推测可能有正丁基-葡萄糖苷的生成。