环状RNA hsa-circ-0015022作为胰腺癌新型诊断生物标志物及其对胰腺癌细胞生物学行为影响的研究

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目的:从胰腺癌病人血液和组织两方面分析,探索hsa-circ-0015022作为胰腺癌诊断生物标志物的可行性。并探索过表达和敲减hsa-circ-0015022后对胰腺癌细胞生物学行为的影响。方法:选择胰腺癌组织30例,相应的癌旁组织(对照组)30例,作为研究用的组织标本。选择胰腺癌患者血液30例,健康志愿者血液(对照组)30例作为研究用的血液标本。其中组织样本和血液样本的来源为不同的胰腺癌患者。h sa-circ-0015022的表达情况使用实时荧光定量聚合酶链式反应(Quantitative Re al-time Fluorescent Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR)检验。临床病理数据用于分析该指标与胰腺癌患者年龄、性别、肿瘤直径、血清CEA水平、临床分期、TNM分期、血管受侵以及淋巴受侵等的相关性。结合CA19-9,探讨hsa-circ-0015022能否作为胰腺癌诊断的生物标志物。选择胰腺原发癌细胞系Capan-2和胰腺转移癌细胞系SW1990作为研究对象。在这两种细胞系中,过表达和敲减hsa-circ-0015022。然后通过Cell Counting Kit 8(CCK8)、Transwell和划痕实验的方法观察细胞增殖、侵袭和迁移的生物学行为有何变化结果:1.hsa-circ-0015022在胰腺癌组织以及胰腺癌患者血液中相较于对照组均高表达(P<0.01)。2.组织样本的临床病理分析显示hsa-circ-0015022的表达情况与临床分期、TNM分期中的N分期及淋巴受侵有关(P<0.05),血液样本的临床病理分析显示h sa-circ-0015022的表达情况与TNM分期中的N分期以及血清CA19-9水平有关(P<0.05)。3.单独使用hsa-circ-0015022的诊断效率如下:ROC曲线下面积0.70,临界值10.17,敏感性0.6230(0.4896-0.7439),特异性0.7097(0.5196-0.8578)。如果联合CA19-9,诊断效率如下:ROC曲线下面积增至0.85,敏感性增至0.7705(0.6450-0.8685),特异性增至0.8387(0.6627-0.9945)。4.在Capan-2和SW1990细胞中,过表达hsa-circ-0015022后细胞增殖增加,敲减hsa-circ-0015022后细胞增殖减少(P<0.01)5.在Capan-2细胞中,过表达hsa-circ-0015022后细胞侵袭能力增强(P<0.05),敲减hsa-circ-0015022后细胞侵袭能力下降(P<0.01)。在SW1990细胞中,过表达hsa-circ-0015022后细胞侵袭能力增强,敲减hsa-circ-0015022后细胞侵袭能力下降(P<0.01)6.在Capan-2和SW1990细胞中,过表达hsa-circ-0015022后细胞迁移增加,敲减hsa-circ-0015022后细胞迁移减少(P<0.01)。结论:hsa-circ-0015022高表达的情况在胰腺癌组织以及胰腺癌患者血液中都存在,而且可能与TNM分期中的N分期有关。与CA19-9联合使用,可能会作为生物标志物,用于协助胰腺癌诊断,尤其是协助诊断胰腺癌的N分期情况。过表达hsa-circ-0015022使胰腺癌细胞的增殖能力、侵袭能力及迁移能力增加,在胰腺癌的发生发展中可能起促癌作用。抑制hsa-circ-0015022会使胰腺癌细胞上述细胞学行为下降,可能成为胰腺癌治疗的潜在靶点。
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