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目的:检测神经元经历氧糖剥夺/复氧（oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R）后Norad,Pum2和Mff的水平及结合变化。方法:首先,将培养的原代神经元分为8组,对照（Control）组和OGD/R后0.5小时、1小时、1.5小时、2小时、4小时、6小时和12小时组,每组3次生物重复,蛋白质印记（Western blot）技术检测原代神经元中Pumilio2（Pum2）和线粒体裂变因子（mitochondriafissionfactor,Mff）的表达水平,并使用免疫荧光染色技术定性分析两种蛋白,使用定量聚合酶链反应（quantitative polymerase chain reaction,qPCR）技术检测原代神经元中lncRNA-Norad和MffmRNA的转录水平。然后将培养的原代神经元分为Control组和OGD/R组,使用RNA免疫共沉淀（RIP）技术检测Pum2与Norad和Mff mRNA结合水平变化情况。结果:1.OGD/R后,原代神经元中Norad水平上升,在OGD/R后1小时达到最高水平。2.OGD/R后,原代神经元中Pum2水平下降,在OGD/R后1.5小时达到最低水平,并且OGD/R后Pum2与Norad结合水平降低。3.OGD/R后,原代神经元中Mff水平上升,在OGD/R后2小时达到最高水平,并且MffmRNA水平在OGD/R后没有明显改变,但是OGD/R后Pum2与Mff mRNA结合水平升高。结论:在小鼠神经元受OGD/R影响后,Norad水平首先出现上调,一方面结合更多的Pum2蛋白,另一方Pum2在OGD/R后表达下调,结合两方面因素导致Pum2与Mff mRNA的结合减少,解除了对Mff的翻译抑制作用,导致Mff表达的大量增加。目的:探究Norad-Pum2-Mff轴对氧糖剥夺/复氧后神经元损伤的影响方法:将培养的原代神经元分为4组,分别为Control组,OGD/R组,OGD/R+Vector组和OGD/R+OE-Pum2组,每组在每种试验中3次生物重复。分别进行western blot和免疫荧光染色验证转染效率。RIP试验验证干预后Mff蛋白水平。电镜检测及线粒体标志物免疫荧光染色观察线粒体形态变化。Mito-SOX染色和Hoechst染色检测神经元早期凋亡水平。结果:1.与Control组相比,OGD/R后,Mff水平上升,在Pum2过表达干预之后,Mff蛋白水平显著降低。2.RIP检测发现与OGD/R+Vector组相比,Pum2过表达可以显著增加与Mff mRNA的结合水平,抑制Mff的翻译。3.在OGD/R后,线粒体网络收到破坏,线粒体分支断裂。而相较于OGD/R+Vector组,在过表达Pum2之后,线粒体网络发生明显改善,分支长度增长。4.电镜观察线粒体形态学变化,与Control组相比,OGD/R后,线粒体发生明显肿胀、变形,线粒体内嵴结构消失。在Pum2过表达后,线粒体肿胀明显减轻,崤结构破坏明显改善。5.Hoechst和Mito-SOX检测神经元早期凋亡水平,相较于Control组,OGD/R后神经元凋亡水平明显增多;与OGD/R+Vector组相比,OGD/R+OE-Pum2组神经元凋亡数量明显降低。结论:通过过表达Pum2可以通过抑制Mff翻译有效改善OGD/R后神经元中线粒体损伤,减少神经元凋亡。这表明Norad-Pum2-Mff轴在OGD/R后神经元损伤调控中发挥着重要作用。目的:探究Norad-Pum2-Mff轴对实验性小鼠脑缺血再灌注损伤的影响。方法:将132只小鼠（共使用155只小鼠,存活141只,去除9只）分为四组,分别为 sham 组,MCAO/R 组,MCAO/R+Vector 组和 MCAO/R+OE-Pum2 组,每组33只。随机选取每组12只用于行为学评分、踏空试验,贴纸移除试验和转轮试验;剩余存活的21只小鼠在MCAO/R模型建立6小时后立即麻醉处死,并收集脑组织进行western blot和免疫荧光染色检测Pum2及Mff表达水平,Tunel染色用于检测神经元凋亡水平,电镜实验用于线粒体形态分析,TTC染色检测小鼠脑梗死面积。结果:1.与sham组相比,MCAO/R后,线粒体发生明显肿胀、变形,线粒体嵴结构消失。在Pum2过表达后,线粒体肿胀明显减轻,嵴结构破坏明显缓解。2.Pum2过表达干预后,脑梗死面积明显小于MCAO/R+Vector组。3.与sham组相比,MCAO/R组Tunel阳性神经元比例增多;而与MCAO/R+Vector组相比,MCAO/R+OE-Pum2组Tunel阳性神经元比例显著减少。4.与sham组相比,MCAO/R组小鼠神经行为学评分显著升高、贴纸触碰及移除时间明显延长、转棒运动时间明显缩短;而Pum2过表达组较对照组明显改善。结论:Norad-Pum2-Mff轴通过减轻线粒体损伤缓解MCAO/R后小鼠脑组织中神经元凋亡,改善了小鼠神经行为学功能,表明Norad-Pum2-Mff轴在小鼠缺血再灌注脑损伤中发挥重要的神经保护作用。