【摘 要】
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背景结直肠癌(Colorectal cancer)对全球公共卫生健康构成极大的挑战。非SMC凝缩蛋白Ⅰ复合物亚基G(The non-SMC condensin I complex subunit G,NCAPG)是一种与细胞周期相关的缩合蛋白。最近,众多学者开始探索NCAPG在癌症中发挥的作用。然而,NCAPG在结直肠癌中的作用尚未被阐明。本研究旨在临床标本和体外实验中探索NCAPG在结直肠癌中的
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背景结直肠癌(Colorectal cancer)对全球公共卫生健康构成极大的挑战。非SMC凝缩蛋白Ⅰ复合物亚基G(The non-SMC condensin I complex subunit G,NCAPG)是一种与细胞周期相关的缩合蛋白。最近,众多学者开始探索NCAPG在癌症中发挥的作用。然而,NCAPG在结直肠癌中的作用尚未被阐明。本研究旨在临床标本和体外实验中探索NCAPG在结直肠癌中的生物学功能和潜在分子机制,为结直肠癌患者的诊断和治疗提供理论依据。方法(1)应用免疫组化技术,观察91例结直肠癌和癌旁组织NCAPG的表达及其与临床病理特征的相关性。(2)利用RT-qPCR和Western blot技术检测NCAPG在结直肠癌组织和细胞中的表达。(3)使用慢病毒感染结直肠癌细胞,构建NCAPG敲低/过表达的稳定细胞系。(4)通过CCK-8实验、Transwell实验探究结直肠癌细胞敲低/过表达NCAPG后增殖、迁移和侵袭能力的改变。(5)利用RT-qPCR和Western blot技术检测结直肠癌细胞敲低/过表达NCAPG后对上皮间质转化的影响。(6)使用RT-qPCR和Western blot方法探究结直肠癌细胞敲低/过表达NCAPG后对Wnt/β-catenin相关标记物的影响。(7)利用免疫共沉淀技术检测结直肠癌细胞中NCAPG与β-catenin耦合情况。(8)采用免疫荧光技术检测β-catenin在敲低/过表达NCAPG的结直肠癌细胞系中的入核情况。结果(1)NCAPG在结直肠癌组织中呈阳性表达(P<0.05),且与肿瘤的分化程度、淋巴结转移和血管侵犯相关(P<0.05)。(2)NCAPG在结直肠癌细胞和组织中均为过表达(mRNA和蛋白)。(3)敲低NCAPG对结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力具有抑制作用,而过表达NCAPG则表现相反作用。(4)敲低HCT116/SW480细胞的NCAPG后,E-cadherin和p-β-catenin表达水平升高,而Vimentin、β-catenin、c-Myc和CCND1表达下调;过表达NCAPG则表现出相反的结果;GSK-3β在敲低和过表达NCAPG后蛋白水平均无明显变化。(5)在结直肠癌中,NCAPG和β-catenin是以复合物形式存在的;敲低NCAPG后降低了β-catenin入核,过表达NCAPG则促进了β-catenin入核。结论NCAPG可能是通过与β-catenin结合激活Wnt/β-catenin信号通路,进而调控结直肠癌的进展和转移。
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