【摘 要】
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目的：大量扩增重组腺病毒以满足体内外实验需求;纯化病毒达到体内外药效学实验的用药标准。方法：利用293细胞包装并批量制备体内外实验所需重组腺病毒。利用GFP及有限稀释法测
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目的：大量扩增重组腺病毒以满足体内外实验需求;纯化病毒达到体内外药效学实验的用药标准。方法：利用293细胞包装并批量制备体内外实验所需重组腺病毒。利用GFP及有限稀释法测定病毒滴度和感染靶细胞的效率。氯化铯梯度离心纯化病毒并提高病毒的滴度。利用病毒透析袋透析病毒,去除氯化铯，以减少体内实验中由此带来的毒副作用。结果：AdIκBαM经扩增后的滴度为1.9×108pfu/L; AdIκBα的滴度为2.8×108pfu/L。经氯化铯梯度离心后AdIκBαM的滴度为2.1×108pfu/L; AdIκBα的滴度为2.9×108pfu/L。重组腺病毒AdIκBαM可有效感染293包装细胞，HepG2肝癌细胞和Hela细胞，完全感染靶细胞HepG2的MOI值为20；对正常内皮细胞株HUVEC感染效率极低，提示该重组腺病毒具有潜在的临床应用价值。结论：本实验解决了重组腺病毒大量扩增的难题以及利用氯化铯梯<WP=12>度离心技术纯化病毒以及透析病毒等难点,为其产业化提供可靠的实验室依据。
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