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研究背景:胰腺癌是消化系统中高度恶性的肿瘤,发病隐匿,病程进展迅速。由于早期症状不明显且缺乏相应的特异性,故胰腺癌的早期诊断较为困难。大多数患者一经确诊时已经处于中晚期且因为肿瘤的远处转移和血管浸润早已失去手术的机会,而胰腺癌根治性手术切除是患者能够获得较长生存率的唯一的机会。此外胰腺癌细胞容易产生耐药性,对放疗化疗均不敏感和临床缺乏针对胰腺癌的靶向药,这些因素导致了胰腺癌的预后极差,其术后5年生存率小于5%。目前认为多种基因参与了胰腺癌的发生发展,因此探索胰腺癌的发病机制,寻找胰腺癌中新的生物标记和治疗靶点是提高胰腺癌患者预后的的关键。MicroRNA(miRNA)是一组长度在17-25个核苷酸之间的小分子非编码RNA,通过与靶基因3’-UTR碱基互补配对在转录后水平调控基因的表达。越来越多的研究表明miRNA的异常表达与肿瘤的发生,发展,预后密切相关。因此深入研究miRNA在胰腺癌中的表达情况及其功能作用,对探索胰腺癌的发病机制具有重要意义,且将有利于对胰腺癌的诊断、治疗及预后的判断,并可作为干预治疗的靶点。研究目的:分析57例胰腺癌患者的癌组织与癌旁组织中的miR-24-3p的表达情况及临床意义。初步探讨miR-24-3p在胰腺癌中的作用机制以及miR-24-3p的表达变化对人胰腺癌细胞生物学行为的影响。研究方法:收集57例胰腺癌初诊患者术后的癌组织及癌旁组织,用实时荧光定量PCR技术检(qRT-PCR)测miR-24-3p在胰腺癌组织和相应癌旁组织中的表达情况,用χ~2检验分析miR-24-3p的表达与胰腺癌患者临床病理指标之间的相关性。分别上调和下调miR-24-3p的表达,用qRT-PCR和Western blot检测APAF1基因和蛋白的表达水平,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)检测细胞增殖活性,用流式细胞术检测细胞早期凋亡,用transwell检测细胞迁徙。研究结果:miR-24-3p在胰腺癌组织中相对高表达;miR-24-3p的表达与患者的年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤位置和血管浸润无关(p>0.05),而与肿瘤的大小、TNM分期和淋巴结转移相关(p<0.05)。Western blot结果显示,在胰腺癌细胞中上调miR-24-3p的表达可以抑制APAF1蛋白的表达。流式结果表明,miR-24-3p的过表达可以抑制胰腺癌细胞早期凋亡并促进胰腺癌细胞从G0/G1期向S期转变,CCK-8和集落形成实验结果证明,miR-24-3p可以促进胰腺癌细胞的增殖,transwell实验结果显示,miR-24-3p可以明显促进胰腺癌细胞的迁移。研究结论:miR-24-3p在胰腺癌组织中的表达明显高于其癌旁组织,提示其参与了胰腺癌的发生发展过程并通过靶向作用于APAF1发挥着类癌基因的作用。