目的目前对于LRIG2的研究主要是该基因对肿瘤的直接作用,为研究LRIG2基因对免疫细胞功能的调控作用,故本研究用构建Lrig2过表达的病毒感染小鼠巨噬细胞,以研究Lrig2对小鼠巨噬细胞周期、细胞增殖和对LPS刺激的巨噬细胞功能影响。方法构建小鼠Lrig2病毒载体,通过转染293T细胞包装Lrig2慢病毒颗粒。在无菌环境下,M-CSF诱导小鼠骨髓干细胞分化7天获得巨噬细胞后,用Lrig2慢病毒感染巨噬细胞,使巨噬细胞过表达Lrig2基因。对过表达Lrig2的巨噬细胞进行流式分析,检测Lrig2对细胞周期和增殖的影响;再进行LPS刺激后,通过实时定量PCR检测Lrig2对LPS刺激的巨噬细胞功能分子基因表达的影响。结果Lrig2对于巨噬细胞的细胞周期没有明显的影响,与感染空载体的巨噬细胞相对照,流式细胞术检测感染Lrig2病毒的巨噬细胞在G0/G1期、S期和G2/M期的细胞百分比并没有明显的区别。通过流式细胞术检测细胞增殖相关的核抗原Ki-67的阳性细胞百分比,设立阴性对照组,感染空载体的巨噬细胞与感染Lrig2病毒的巨噬细胞相比,Ki-67的平均荧光密度MFI由4696明显升高到10608,结果具有统计学差异,提示Lrig2能促进巨噬细胞增殖。RT-PCR检测显示,与感染空载体的巨噬细胞Control组相比,LPS刺激的感染Lrig2慢病毒的巨噬细胞组(LRIG2巨噬细胞组)中与巨噬细胞活化相关的Ym-1(Chil3)、Klf 9和Fizz1m RNA表达量在第0h、4h、8h、16h和24h均明显低于Control组,提示巨噬细胞的活化可能受到了抑制。但对巨噬细胞活化有抑制作用的Socs2和Icosl基因的m RNA表达量随着时间增加各时间点m RNA表达量之间并未显示出明显差异。对于Tgf-β基因,与Control组相比,仅在4h时m RNA表达量升高,其他时间点的m RNA表达量均下降,变化有瞬时性,Lrig2对Tgf-β基因在巨噬细胞活化中产生的影响还有待于进一步的研究。C-myc m RNA表达量与Control组相比较时,在LRIG2组中各时间点m RNA表达量降低且差异有统计学意义,提示LRIG2有促进巨噬细胞分化的作用。但对Pdl 1和Ppar-γ两个能促进巨噬细胞向M2型分化因子和M2型巨噬细胞标记基因Arg-1的m RNA各时间的表达量进行分析,Control组和LRIG2组之间差异并无规律,因而不能判断Lrig2是否有促进巨噬细胞向M2分化的作用。结论体外实验结果提示Lrig2能够促进巨噬细胞的增殖并在m RNA水平对LPS刺激的巨噬细胞活性产生抑制作用,且有可能有助于巨噬细胞向M2型分化。Lrig2基因在巨噬细胞活化及向M2分化中的作用与机制尚有待在蛋白及细胞水平做出进一步研究。