基质金属蛋白酶-2、VEGF在毛细血管瘤不同时期表达

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目的: 应用光镜、免疫组化技术观察基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)与血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在毛细血管瘤不同分期中的表达,了解毛细血管瘤出现迅速增长期及随后的退化期的一个原因,为临床的治疗和预后提供一个理论学的依据。 方法: 标本取自承德医学院附属医院1998~2005年毛细血管瘤手术切除的标本,按光镜下Mull iken标准,病理诊断分为三组。增生期组:可见大量增生活跃的内皮细胞,形成团快状,肥大细胞数目明显增多,管腔少或形成裂隙,基底膜多层;退化期组:血管内皮细胞明显减少,形成大量毛细血管腔,血管组织内20%以上部位纤维变性和脂肪侵润;退化完成期组:原管腔部分被大量脂肪及纤维组织代替,管腔被压缩而变窄甚至闭塞。另取正常带血管皮肤作为对照组。10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,5μm连续切片,每例切片均行HE染色。应用SP免疫组化方法对各组抗原进行标记。分别用鼠抗人MMP-2单克隆抗体(克隆号CA4001,迈新公司)及鼠抗人VEGF单克隆抗体(克隆号JH121,迈新公司)作为一抗。采用MaxVision快速免疫组化方法二步法检测(Maxvision试剂盒Kit5001,迈新公司)及DAB染色。免疫组化检测前采用0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液(PH6.0)经微波处理修复抗原,其余步骤参照迈新公司免疫组化染色步骤说明书。在高倍镜下(x 200)计算8~10个随机视野,计算胞浆阳性细胞所占的百分数。MMP-2阳性细胞<10%为(-),阳性细胞≥10%为(+);VEGF阳性细胞<10%为(-),阳性细胞在10%~49%为(+),阳性细胞≥50%为(++)。阳性对照为迈新公司提供的阳性片,阴性对照用小牛血清PBS液代替一抗进行实验。数据的统计学处理:MMP-2与VEGF表达的相关性采用Spearman等级相关分析;不同组间VEGF表达的差别比较采用H检验、不同组间MMP-2表达的差别比较采用x<2>检验。 结果: 随着毛细血管瘤病理时期的变化,MMP-2与VEGF出现明显不同的表达。增生期组MMP-2与VEGF的阳性表达率明显高于其他各组,且随着毛细血管瘤的退化,二者的阳性表达率逐渐下降,至退化完成期时与对照组几无差别。MMD-2与VEGF的表达呈正相关。 结论: MMP-2与VEGF是直接作用于血管内皮细胞的物质,是毛细血管瘤出现不同时期病理变化的决定性因素之一。随着血管瘤的逐渐转归,MMP-2与VEGF的表达逐渐降低,说明二者促进新生血管形成的作用逐渐减弱,这也提示我们应用抑制MMP-2及VEGF的药物是否可以在毛细血管瘤发生的早期就促使其退化。
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