完整细胞的毛细管电泳新方法探索

来源 :中国科学院化学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sophiayingfeng
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为开发毛细管电泳方法在完整细胞研究中特有的优势,本论文开展了系统研究,先后建立了细胞的常规毛细管电泳研究方法和细胞的显微图像毛细管电泳研究方法,包括仪器系统及细胞某些性质研究。 1、细胞的常规毛细管电泳研究包括:1)以大肠杆菌为模式细胞,详细研究了缓冲液的种类、浓度、样品超声和震荡时间对电泳峰形和重现性的影响,发现缓冲液的浓度是影响细菌峰形的关键因素,细胞洗涤方法对大肠杆菌峰形也有明显的影响,其中超声的作用比涡旋震荡大,建立了以Tris-硼酸为缓冲体系的高效分离和定量方法,可用于微量细胞培养的生长曲线绘制;2)研究了红细胞对利巴韦林的吸收问题,建立了体外细胞药物吸收的毛细管电泳测定方法,获得了人、鼠、兔三种红细胞对相同浓度利巴韦林的不同的动态吸收曲线,推算了相应的细胞内浓度,发现不同种类的细胞对利巴韦林的吸收速率有显著的差异。 2、细胞的显微毛细管电泳研究:为提高分析速度和结果的直观性,设计并搭建了显微毛细管电泳装置,用此分别观测了人、兔等不同细胞及其混合样品的电泳过程中,尝试了细胞电泳淌度的高速测定和细胞吸附行为的直接观测,估算了吸附引起的淌度损失,并将该显微方法与紫外系统联用,测定并关联了细胞电泳紫外谱图和图像数据,解释了细胞电泳峰分布的若干原因。
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