分子伴侣(molecular chaperone)是一类在进化上十分保守的蛋白家族,它们能非特异性的结合不同大小、结构和功能的蛋白质并能介导催化这些蛋白质形成特定构象,在生物体内起着稳定新生蛋白、辅助其他蛋白并使其能准确组装、转运、折叠甚至降解,对于蛋白质功能的正常发挥具有十分重要的作用。本文通过克隆表达,获得来自腾冲热海的噬菌体TSP4(其宿主菌为栖热菌TC16菌株)的分子伴侣CPN47和裂解酶lysin、来自宿主菌为栖热菌TC16菌株的脱氧尿苷焦磷酸酶(dUTPase),并购买商业化的胆碱酯酶,分析CPN47对不同来源的酶蛋白热稳定性的影响。结果表明,分子伴侣CPN47能显著提高来自栖热菌TC16噬菌体TSP4的裂解酶lysin的热稳定性,在78℃的条件下处理20分钟,未加入CPN47时,裂解酶lysin的抑菌圈大小为没经过高温处理对照组的一半,而经过78℃高温处理并加入了CPN47的裂解酶lysin的抑菌圈和对照组大小相似。在高温条件下,dUTPase在加入CPN47的情况下能保持更高的酶活性。同样的方法也证明,CPN47能使外源的胆碱酯酶在高温下的保持较高的酶活性。此外,通过将带有CPN47质粒的大肠杆菌在46℃下进行培养表明,大量表达的分子伴侣CPN47可以显著提高大肠杆菌对高温的耐受性,提高其生存率。值得一提的是,分子伴侣CPN47作为从高温噬菌体中分离得到的分子伴侣,室温放置48小时后分子伴侣CPN47的ATPase活性开始明显降低。本文还将带有11is标签的分子伴侣CPN47吸附于镍柱上,然后将未带有his标签的酶蛋白分子通过镍柱,最后用咪唑洗脱镍柱后,将洗脱液进行SDS-PAGE电泳分析,证明了分子伴侣CPN47能与酶蛋白分子进行高效的结合,形成蛋白复合体。综上所述,分子伴侣CPN47能提高酶蛋白的热稳定性,其没有蛋白种类和来源的偏好性,保护蛋白分子不受高温破坏,具有一定的应用价值。