甘露寡糖对内毒素血症小鼠炎症的影响及合生制剂的制备研究

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甘露寡糖是一类功能性低聚糖,具有较好的稳定性、热值低以及安全无毒性等特点。甘露寡糖可被用作益生元,它具有多种生理作用功能。其中,甘露二糖具有增强机体免疫,促进肠道消化吸收,抗沙门氏菌感染,减轻花粉过敏以及抑制Aβ肽诱导的毒性反应,保护神经纤维等益生功能。本研究通过以下方面来探究甘露二糖和甘露二、三、四糖的功能以及合生制剂的制备方法:(1)采用复合酶水解工艺降解半乳甘露聚糖,利用酵母吸收酶解液中的单糖成分,获得甘露二糖(M2)以及甘露二、三、四(M2-4)混合寡糖。对内毒素血症小鼠进行干预,结果表明该方法制备的甘露二糖和混合寡糖不仅能显著缓解LPS诱导的小鼠体重减轻、肺水肿,还能抑制肝、肺、结肠炎症细胞的浸润,减轻组织损伤,降低血清样本中肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)等炎症因子的水平,并提高抗炎因子白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)水平。甘露二糖和混合寡糖均能缓解LPS诱发的炎症反应,对内毒素小鼠提供一定的保护作用。(2)添加甘露二糖以及混合寡糖可以使大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害菌聚集成团,产生凝集现象。同时,甘露二糖以及混合寡糖对不同微生物生长状态具有不同影响,植物乳杆菌8198(Lactobacillus plantarum)等有益菌可利用其作为碳源生长,大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)不能利用其作为碳源生长。(3)制备了包含干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)LH23和甘露二糖或混合寡糖的合生制剂。以槐豆胶为底物,多酶协同水解获得含有单糖和甘露寡糖的混合液,并利用干酪乳杆菌LH23处理掉混合液中的单糖,纯化得到甘露二糖和甘露二、三、四糖,并将混合液冻干制备合生制剂。结果表明,在底物浓度为1%和混合液中菌的浓度为2.6×1010CFU/m L时,合生制剂中干酪乳杆菌LH23的冻干存活率最高并可达89%,同时在此条件下混合物中的单糖被完全消耗,大大提高了合生制剂中甘露寡糖的纯度和活菌数量。
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