目的 制备小鼠肝癌H₂₂细胞与树突状细胞（DC）相融合、经筛选获得新的高表达共刺激分子的杂交瘤苗H₂₂-DC，并分析H₂₂-DC的生物学特性及诱导特异性CTL活性。 方法 利用Metrizamide密度梯度离心及DC的半粘附性和FcR^-直接从小鼠脾脏中分离出纯度较高的DC；再用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）和白细胞介素-4（IL-4）共培养，诱导DC扩增，以获得大量的DC；用聚乙二醇（PEG）使DC与肝癌H₂₂细胞融合，并用CD11c MicroBeads标记，Mini MACS磁式细胞分选器分选融合细胞(H₂₂-DC)。应用细胞培养技术、免疫细胞化学技术及光镜技术检测H₂₂-DC的生长特性和形态学特征；从BALB/C小鼠右腋皮下接种H₂₂-DC，观察体内致瘤性并用MTT比色法检测小鼠脾CTL活性。 结果 ①分离扩增的DC为CD11c阳性细胞，形态不规则，并高表达CD80、CD86和CD54分子；H₂₂细胞为CD11c阴性细胞，呈圆形，胞体较大，不表达CD80、CD86和CD54分子。H₂₂-DC为CD11c阳性，细胞体积较大，呈圆形、扁平或不规则形，，也高表达CD80、CD86和CD54分子。②H₂₂-DC在体外能分裂增殖，但生长曲线较平坦，增殖活性明显低于H₂₂细胞。③H₂₂-DC接种于小鼠体内超过60天仍未见肿瘤形成，与对照组有高度显著性差异（P＜0.01）。④接种活H₂₂-DC的免疫小鼠，其针对H₂₂细胞的脾CTL活性明显高于对照组小鼠（P＜0.01）。 结论 ①经Metrizamide密度梯度分离和GM-CSF、IL-4联合扩增的小鼠脾DC为形态和功能成熟的DC。②采用PEG融合、CD11c磁 汕头大学医学院硕士学位论文殊标记、Mini MACS分选法获得的HZ。DC兼具两种亲本细胞的某些特性，方法简便可靠，有实用价值。③HZ。0C增殖活性明显降低，且无体内致瘤性，已失去其亲本H22细胞的恶性生长特征。④H22＊C能明显激活小鼠脾特异性的CTL活性，提示融合细胞己获得亲本DC提呈抗原的功能，可提呈目前尚未鉴定的H。。特异性肿瘤抗原，诱导抗肿瘤兔疫；H22与DC简单混合虽然也能明显激活特异性的CTL活性，有一定抑制肿瘤生长的作用，但不能阻止肿瘤形成。表明DC瘤苗有望成为肝癌免疫治疗的一条新途径。