10-羟基癸烯酸诱导肝癌细胞凋亡、周期阻滞及迁移抑制的分子机制

来源 :黑龙江八一农垦大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jeans
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
肝癌是一种常见的恶性肿瘤,具有恶性程度强、死亡率高、侵袭和转移性强等特点。常见的化疗药物主要有顺铂、洛铂和5-氟尿嘧啶(5-FU)等,存在副作用大、价格昂贵等问题。因此,寻找和开发一种经济、安全、低毒的潜在天然抗肝癌辅助活性成分或功能因子已成为当前研究热点。10-羟基癸烯酸(10-HDA),是蜂王浆中特有的活性成分,具有抗菌消炎、提高免疫力、抗肿瘤、抗辐射等多种生物活性。在细胞及分子水平探究10-HDA的抗肝癌分子机制,并阐明其对肝癌细胞诱导凋亡、周期阻滞、活性氧(ROS)水平调控、迁移抑制作用及其对相应信号途径的调控效果,为开发抗肝癌的功能因子和新型抗肿瘤功能性食品提供新的思路和一定的理论依据。以10-HDA为研究对象,以肝癌细胞系为研究模型,通过CCK-8比色法检测10-HDA对肝癌细胞系(Hep G2、Hep3B、Huh7)的杀伤作用和对正常肝、肺、胃细胞(L-02、IMR-90、GES-1)的毒副作用;通过Hoechst 33342/PI双染法、Annexin V/PI染色法以及流式细胞术检测10-HDA对肝癌细胞的诱导凋亡作用;通过流式细胞术及蛋白质免疫印迹法检测10-HDA对肝癌细胞的细胞周期阻滞作用、MAPK/STAT3/NF-κB信号通路之间的关系及相关蛋白的表达情况;通过DCFH-DA荧光探针法和蛋白质免疫印迹法检测10-HDA对肝癌细胞内ROS水平、相关信号通路的调控情况及细胞核转录因子STAT3和NF-κB的表达情况;通过细胞划痕实验和蛋白质免疫印迹法检测10-HDA对肝癌细胞的迁移抑制作用及其相关蛋白的表达情况。10-HDA对肝癌细胞系具有明显的杀伤作用;同时,10-HDA对正常细胞的毒性明显低于5-FU。10-HDA抑制Bcl-2的表达水平,促进Bax的表达水平,使线粒体凋亡途径被激活,线粒体膜电位下降,从而释放细胞色素C(Cytochrome C,Cyt C),Caspase-3被活化,最终使细胞发生线粒体依赖性凋亡,凋亡率高达49.24%。此外,10-HDA激活了丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和信号转导与转录活化因子(STAT)3信号通路,促进了P-JNK、P-P38、IκB-α的表达,抑制了P-ERK、P-STAT3、核转录因子(NF-κB)的表达,但在加入MAPK抑制剂后被阻断;10-HDA抑制细胞核内STAT3和NF-κB核转录因子的表达;10-HDA可通过促进周期蛋白P21的表达,抑制周期蛋白P-AKT、CDK1/2、Cyclin A/B1的表达,使细胞在G2/M期发生周期阻滞;10-HDA能够诱导ROS堆积,在n-乙酰-l-半胱氨酸(NAC)处理后,细胞凋亡情况及蛋白表达明显被逆转。10-HDA通过抑制TGF-β1、P-GSK-3β、Snail、Twist、N-cadherin和Vimentin的表达,上调E-cadherin的表达,使细胞迁移作用被抑制。综上所述,10-HDA能够增加细胞内ROS水平,调控MAPK、STAT3和NF-κB信号通路,使肝癌细胞发生线粒体依赖性凋亡,抑制了AKT信号通路,影响下游周期相关蛋白表达,进而使肝癌细胞在G2/M期发生周期阻滞。此外,10-HDA抑制了TGF-β1信号通路,使肝癌细胞迁移受到了抑制。
其他文献
试验于2018-2019年在黑龙江省大庆市林甸县宏伟乡吉祥村试验基地进行。以绿丰2号和绿丰5号两个绿豆品种为试验材料,本试验播种前分别使用海藻酸钠寡糖(AOS)、1-(2,4-二氯甲酰氨基环丙羧酸)(B2)、5-氨基乙酰丙酸(ALA)、抗光解S-ABA(SABA)、冠菌素(COR)5种植物生长物质对绿豆种子进行拌种处理,以未进行种子拌种处理为对照(CK)。研究5种植物生长物质对绿豆生长发育过程中形
黑龙江省大庆市地处松嫩平原,部分土地盐碱化程度较重。盐碱土中含有大量的耐盐碱菌株,其中部分具有特殊的促生功能,可以作为有益促生菌促进植物生长,提高植物对盐碱的抗性。本研究以大庆地区盐碱土为实验材料分离耐盐碱促生菌,挑选促生功能较全、促生效果较好的菌株进行菌种鉴定,应用红小豆种子发芽和插条试验验证促生菌在盐碱胁迫条件下的促生效果,选择促生效果好的菌株组成2组复合菌剂,通过插条试验比较2组复合菌剂的促
马铃薯黑痣病是由立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)引起的一种土传真菌病害,对马铃薯的产量和品质都造成了严重的影响,很大程度制约了我国马铃薯产业的发展。随着绿色农业发展,生物防治日益受重视,对土传病害有较好的防控效果。本研究旨在筛选出对马铃薯黑痣病菌抑制效果好的木霉菌株,通过盆栽及田间试验,探索木霉菌对马铃薯黑痣病的生防效果及机制,为木霉菌剂的研发和马铃薯黑痣病的生物防治提供理论依据
为探究外源褪黑素浸种对干旱胁迫下大豆苗期抗旱性的调节效应,明确褪黑素浸种缓解干旱胁迫对大豆苗期调控的生理机制,本研究于2019-2020年在黑龙江八一农垦大学国家杂粮工程技术研究中心进行,以大豆品种绥农26和黑农48为试验材料,分别设置正常供水处理(CK)、干旱胁迫处理(D)和干旱胁迫+褪黑素浸种处理(D+M),研究了外源褪黑素对干旱胁迫下大豆形态特征、生理特性、光合特性和产量的影响。试验结果表明
基于作物养分信息变量施肥技术是未来农业的重要方向之一,其技术根据作物营养信息弥补前期施肥不足与不均等问题。以往变量施肥信息处理多采用处方图的形式,缺乏信息实时处理与应用,由于这一原因导致传感器变量施肥实时性无法保障,因此结合玉米中耕变量施肥农艺要求和技术指导,针对变量施肥的施肥位置准确性与实时性问题,开发快速变量施肥调控系统,并对系统调控效果进行试验验证。(1)分析变量调控系统的设计目标要求,根据
随着我国人口的快速增长,粮食和蔬菜消耗量逐年增高,作物秸秆难以降解、尾菜堆积造成环境污染,制约了农业的发展。本研究以水稻秸秆和白菜尾菜为原料进行堆肥处理,以木质纤维素快速分解复合菌系作为接菌剂,探究接种微生物强化效果。水稻秸秆和白菜尾菜以质量比7:3进行混合发酵,通过在原料中接种5%(V/V)的木质纤维素快速分解复合菌系进行微生物强化,混合堆肥试验共持续42 d,堆肥体积为1.52m3,定时取样并
马铃薯是我国继水稻、玉米、小麦后的第四大主要粮食作物,我国马铃薯种植总面积及总产量均位居世界首位,在国家粮食生产体系中占据重要位置。马铃薯中耕主要是进行土壤疏松、除去垄田杂草及薯垄培土作业。薯垄培土作业效果、伤苗及除草效果是中耕作业的主要指标。耕作效果能直接影响马铃薯生长状况,提高马铃薯机械中耕作业效果有重要意义。针对目前普遍采用的锄铲式在马铃薯生长前中期其培土量过大,为了解决马铃薯中耕机作业时伤
随着我国轨道交通事业飞速发展,大量铁路轨道穿过农田区域,当轨道交通路线与农田水利设施距离较近时,农田水利设施受轨道交通的影响难以避免,而目前现有设计规范中未考虑这一影响。水工结构中的农田水闸与其他建筑物相比,体积较小、结构单薄、对振动更为敏感,但针对水闸结构振动响应的相关研究较少。列车运行引起的水闸结构振动响应规律及其对结构安全性与耐久性的影响值得深入研究。为了寻求列车运行引起的水闸结构振动响应规
为进一步弥补水田整地方面存在缺陷,提高水稻收割后遗留在水田稻杆利用率,论文针对旋耕类刀具的研究现状,以提高稻杆埋茬率、降低拖拉机油耗以及提高耕后地表平整度作为设计目标,利用静力学分析原理、ANSYS有限元仿真软件、EDEM离散元仿真软件与田间试验方法,对水田搅浆埋茬平地机的主要工作部件打浆刀进行了理论探索与设计。通过查阅旋耕类刀具的现有刀型,根据静力学分析原理,对刀具进行受力与运动分析,建立功耗数
近年来,我国食品安全治理框架日趋完善,但食品真实性问题依然备受关注,食品真实性溯源技术急需发展,技术问题有待突破,目前食品真实性溯源技术方法还都没有形成标准。提高近红外光谱产地溯源技术和矿物元素产地溯源技术产地判别率是目前国内外研究的重点,尤其对于小范围来源样本。本实验以吉林省白城市、山东省泗水县、黑龙江省泰来县和杜蒙县2018年和2019年的120份绿豆为研究对象。采用傅里叶漫反射近红外光谱仪对