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因具有检测速度快、操作简单和成本低廉等优点,免疫层析技术现已被广泛应用于现场检测。传统的胶体金免疫层析试纸条(Colloidal gold immunochromtographic assay)的标记物为20～40nm球形胶体金,因其光学信号弱,导致其检测灵敏度偏低,限制了其在痕量分析中的应用。另外,胶体金试纸条检测一些基质较复杂的样本(如组织样本,饲料样本以及某些粉状基质样本)仍需要复杂的前处理操作去除样本中基质的干扰,从而大大降低了试纸条的检测便利性。相比于球形胶体金,同粒径的金纳米花(AuNFs)摩尔消光系数更高,显色更强,作为信号载体,可提高试纸条的检测性能。此外,将金纳米花的表面修饰配体可极大地提高其在复杂基质中的抗干扰能力,提高检测稳定性。玉米酒精糟饲料样本(DDGS)因组分复杂,会严重降低传统胶体金免疫层析方法的灵敏度、线性范围、准确度和精密度。因此本文旨在利用双亲配体修饰的羧基化金纳米花共价标记抗体制备显色探针,增强其抗基质干扰能力,以提高DDGS中玉米赤霉烯酮(ZEN)的检测稳定性。本课题研制的双亲性配体一端为含巯基的疏水烷烃链,中间含乙二醇单元,而末端含羧基官能团。双亲性配体通过金硫(Au-S)键修饰AuNFs,然后通过将ZEN抗体的氨基与AuNFs的羧基共价偶联获得N-AuNF-Abs。同时,采用传统静电吸附法制备获得了 Tr-AuNF-Abs。首先针对两种金纳米花及探针在离子强度和pH值的耐受性方面进行对比,然后将两种探针应用于免疫层析试纸条,系统对比了耐离子强度和pH耐受、缓冲液和实际样本基质中的ZEN检测灵敏度、稳定性和重现性及产品保质期等多方面性能。对比结果表明本研究所合成的N-AuNFs、N-AuNF-Abs以及N-LFA抗环境干扰能力优异。N-LFA检测磷酸缓冲液中ZEN的IC5O值为15.97ng/mL,Tr-LFA的IC5O值为31.06ng/mL;N-LFA检测玉米酒精糟提取液中ZEN的IC5O值为17.46ng/mL,同时Tr-LFA检测重现性较差,无法实现准确定量。加标回收实验结果显示,N-LFA检测玉米酒精糟中ZEN的批内及批间平均回收率为93.0%-125.9%(变异系数介于2.8%-21.9%之间)。以上结果表明,N-LFA检测复杂玉米酒精糟中ZEN仍具有良好的稳定性和准确度。加速老化研究中,N-LFA的货架期(5年)远优于Tr-LFA(1年)。总之,本研究提供了一种制备稳定性优异的金纳米花探针的方法,所制备探针能有效提高免疫层析技术在检测复杂基质如玉米酒精糟中小分子物质的检测性能。