【摘 要】
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透明质酸(hyaluronic acid,简称HA),是N-乙酰氨基葡萄糖胺和葡萄糖醛酸以β-1,3-糖苷键连接而成的二糖单体重复构建而形成的杂多糖,广泛存在于动物各种组织细胞间质如皮肤、
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透明质酸(hyaluronic acid,简称HA),是N-乙酰氨基葡萄糖胺和葡萄糖醛酸以β-1,3-糖苷键连接而成的二糖单体重复构建而形成的杂多糖,广泛存在于动物各种组织细胞间质如皮肤、关节滑液、软骨、眼球玻璃体以及公鸡鸡冠里。透明质酸具有很大的分子量,赋予其很高的粘弹性,具有保湿、营养和润肤等作用,已被大量用于医药、化妆品工业。以工业化生产为目的发酵透明质酸研究始于80年代初期,目前发酵生产透明质酸所用的菌种,一般是将产生透明质酸的链球菌进行诱变处理得到,诱变方法有紫外线照射、化学诱变剂处理等。链球菌的营养需求较高,为了刺激其产生次级代谢产物透明质酸,需要添加多种生长因子。另外,在发酵液中添加一定量的谷氨酸和精氨酸,可以提高透明质酸的产率。本实验以实验室保藏的兽疫链球菌作为原始菌株,先进行紫外诱变,筛选Glu型。再以Glu菌株为实验材料,进行摇瓶发酵。发酵结束后,用90%的乙醇提取,然后离心得透明质酸。本次实验将对各种氨基酸(Arg、His、Lys、Cys、Met)和碱基(A、G、T、U)的添加量进行最优组合搭配,以优化发酵条件,提高透明质酸的产量。对所获得菌株进行了氮源、碳源、温度及pH等条件的优化,研究结果表明,以上这些生长因子最佳添加配方为:Arg0.07g/L, His0.05g/L, Lys0.07g/L, Cys0. Olg/L, Met0.05g/L, A0.05g/L, G0.06g/L, T0.05g/L, U0.07g/L,其中碳源为葡萄糖最佳,一般添加量为30g/L,氮源为复合型制剂,温度控制在35-37℃,pH调节为中性7为合适。
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