【摘 要】
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以葡萄砧木品种‘F-242’试管苗为材料,克隆了葡萄(Vitis L.)的多磷酸肌醇激酶(inositol polyphosphate kinase,IPK2)基因VvIPK2,并对其进行生物信息学分析;利用实时定量PCR
【机 构】
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青岛农业大学生命科学学院;中国农业大学食品科学与营养工程学院;
【基金项目】
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农业部‘948’项目(2006-G26)
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以葡萄砧木品种‘F-242’试管苗为材料,克隆了葡萄(Vitis L.)的多磷酸肌醇激酶(inositol polyphosphate kinase,IPK2)基因VvIPK2,并对其进行生物信息学分析;利用实时定量PCR和植物生理学技术,结合药理学实验探究了H2O2在葡萄响应低温胁迫中的作用及其与VvIPK2的关系。结果表明,克隆的VvIPK2其推导的翻译产物(VvIPK2)与数据库中推测的氨基酸序列一致;与栽培亚麻和拟南芥多磷酸肌醇激酶高度同源。在低温胁迫下,叶片VvIPK2表达与H2O2水平均明显升高;外源H2O2能提高VvIPK2表达水平,而H2O2清除剂抗坏血酸(ascorbic acid,AsA)降低VvIPK2表达水平。外施一定浓度的H2O2可提高超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,上调Cu/Zn SOD基因表达,降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和细胞膜相对透性;但IPK2抑制剂LY-294002对内源H2O2却无明显影响;LY-294002和AsA均能降低SOD活性,下调Cu/Zn SOD基因表达,提高MDA含量和细胞膜相对透性。推测H2O2调节VvIPK2的表达,参与葡萄响应低温胁迫过程。
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