【摘 要】
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将拟南芥Antiquitin基因重组到原核表达载体pMAL-c4x和pET41中,在T7 Express菌株中诱导表达,经Amylose和Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白。SDS-PAGE结果表明：MBP和His-tag融
【机 构】
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西北农林科技大学生命科学学院,陕西省农业分子生物学重点实验室
【基金项目】
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国家自然科学基金（30300222）,西北农林科技大学优秀人才基金（042R009）
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将拟南芥Antiquitin基因重组到原核表达载体pMAL-c4x和pET41中,在T7 Express菌株中诱导表达,经Amylose和Ni-NTA亲和层析柱纯化获得重组蛋白。SDS-PAGE结果表明：MBP和His-tag融合的拟南芥An-tiquitin主要以可溶性形式存在,表达量分别占细胞总蛋白的25.1%和39.4%。以乙醛和NAD＋为底物测定融合蛋白活性,结果显示：His-tag融合的Antiquitin具有醛脱氢酶活性,比活力为8.98 U/mg,乙醛的表观Km和Vmax值分别为0.98 m
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