细菌内同源重组高效制备人突变p27基因重组腺病毒

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：johnnyhljy

【摘要】

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目的:利用细菌内同源重组法,构建含人突变p27(hp27mt)基因重组腺病毒. 方法:hp27mt自载体pORF9-hp27mt中切出,亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒pShuttle-CMV-hp2

【作者】

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陈珺徐少勇邓长生王家宁黄永章

【机构】

：

郧阳医学院附属人民医院消化内科,郧阳医学院附属人民医院消化内科,武汉大学中南医院消化内科

【出处】

：

第四军医大学学报

【发表日期】

：

2004年5期

【关键词】

：

同源重组细菌重组腺病毒 p27mt基因 homogenous recombination bacteria recombinant adenovious p

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目的:利用细菌内同源重组法,构建含人突变p27(hp27mt)基因重组腺病毒. 方法:hp27mt自载体pORF9-hp27mt中切出,亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒pShuttle-CMV-hp27mt;然后再用PmeI线性化的pShuttle-CMV-hp27mt转化含腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的超感受态BJ5183,使其在细菌内发生同源重组. 重组质粒鉴定正确后经PacI酶切,转入Ad293细胞,包装成重组腺病毒Ad-hp27mt. 采用PCR方法对重组腺病毒进行鉴定

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