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摘要 草地贪夜蛾是一种为害玉米、高粱和小麦等多种作物的世界性重要害虫。于2019年1月从云南入侵我国并迅速扩散到大多数省份。当前我国防控草地贪夜蛾的主要手段是喷施化学杀虫剂。为筛选具有增效作用的杀虫剂混剂，延缓草地贪夜蛾抗药性发展，本文研究了多杀霉素与茚虫威两种不同作用机制的杀虫剂混配对草地贪夜蛾的增效作用。采用饲料混毒法测得多杀霉素与茚虫威对草地贪夜蛾的LD50分别为5.41 μg/g和17.74 μg/g。多杀霉素和茚虫威两种药剂按不同质量比混配对草地贪夜蛾3龄幼虫均表现为相加或者增效作用，其中质量比为1∶9时增效作用最显著，共毒系数为147.3。
关键词 草地贪夜蛾; 联合毒力; 茚虫威; 多杀霉素
中图分类号： S 482.3
文献标识码： B
DOI： 10.16688/j.zwbh.2020321
Abstract Spodoptera frugiperda （J.E.Smith） is one of the most important globally distributed agricultural pests which attack a wide range of crops including maize， sorghum and wheat. Since S.frugiperda invaded Yunnan province in January 2019， it has spread rapidly to most of provinces in China. Currently， spraying chemical insecticides is an important way to control S.frugiperda in China. To screen out the synergistic insecticide mixtures and delay the development of resistance， the joint action of insecticides spinosad and indoxacarb with different modes of action on insects was investigated in this paper. The LD50 values of spinosad and indoxacarb on S.frugiperda were 5.41 μg/g and 17.74 μg/g， respectively. The results showed that the mixtures of spinosad and indoxacarb with different ratios have addition or synergistic effect on S.frugiperda larvae， among which the mixtures at ratio of 1∶9 showed significant synergistic effect and the co-toxicity coefficient was 147.3.
Key words Spodoptera frugiperda; joint toxicity; indoxacarb; spinosad
草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）是一种原产于美洲热带和亚热带地区的毁灭性农业害虫，于2019 年初侵入我国云南普洱地区[1]，并扩散至全国26个省（区、市），主要为害玉米等农作物[2-3]。目前对于草地贪夜蛾的应急防控主要采用化学防治，但国内尚无登记用于防治该害虫的药剂，因此筛选高效安全的化学药剂及其增效组合对于延缓抗药性产生，提高防治效果及支持草地贪夜蛾的防治工作具有积极意义。
茚虫威是美国杜邦公司开发的新型噁二嗪类杀虫剂，进入害虫体内水解为去甲氧羰基代谢物DCJW，作用于害虫神经细胞中的钠离子通道，阻断神经冲动传导，导致昆虫全身僵硬而死亡[4-5]。茚虫威几乎对所有鳞翅目害虫，如棉铃虫 Helicoverpa armigera、小菜蛾 Plutella xylostella、烟青虫 Helicoverpa assulta、甜菜夜蛾 Spodoptera exigua、苹果蠹蛾 Carpocapsa pomonella等有效[6]。也是2019年和2020年农业农村部公布的《草地贪夜蛾应急防治用药推荐名单》中的单剂之一。多杀霉素是由陶氏益农公司开发的一种生物源大环内酯类杀虫剂，其兼具生物农药的安全性和化学农药的高效性，因此在国内农药市场上占据了一定份额[7-8]。因此，本研究将茚虫威这一推荐药剂与生物源杀虫剂多杀霉素进行复配，测定其联合毒力，旨在筛选出复配的最佳配比，为进一步提高对草地贪夜蛾的防效、延缓其抗药性发生和发展提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试昆虫
草地贪夜蛾于2019年5月采自安徽省黄山市黄山区玉米田，在实验室利用玉米叶饲养且不接触任何杀虫药剂。饲养条件为（26±1）℃，相对湿度为30%～60%，光周期L∥D=16 h∥8 h。成虫饲喂10%蜂蜜水，选取3龄初期幼虫进行毒力测定。
1.2 供试杀虫剂
99.0%茚虫威原药购自杜邦公司（上海）;950%多杀霉素原药购自美国陶氏益农公司。
1.3 两种单剂的毒力测定
采用国际杀虫剂抗药性行动委员会推荐的饲料混毒法[9]，用丙酮将2种待测杀虫剂稀释成5个浓度并均匀混入人工饲料中，分别是多杀霉素（4、4.5、5.2、6 μg/g和6.9 μg/g）、茚虫威（3.125、625、125、25 μg/g和50 μg/g），以混毒的饲料饲喂试虫，以添加丙酮的饲料为对照。在12孔培养板中分别加入足量饲料，并在每孔中接入 1 头 3 龄初期试虫，每个浓度至少处理 36 头试虫。置于（26±1）℃，相对湿度为30%～60%，光周期为 L∥D=16 h∥8 h的条件中饲养。48 h后统计各处理组幼虫死亡数量并采用PoloPlus 2.0 （LeOra Software， Petaluma， CA， USA）计算剂量-反应曲线的斜率值、卡方值、LD50 及其95%置信限。 1.4 两种药剂混配增效作用测定
分别将多杀霉素（A）和茚虫威（B）原药用适量丙酮溶解。然后A∶B 按 1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2、9∶1 进行混配。根据混剂的理论 LD50 将不同配比浓度稀释成5个浓度梯度，并设置空白对照，進行杀虫活性测定。最后根据测定结果得到不同配比混剂的LD50，并采用孙云沛法[10]计算不同混配药剂的共毒系数 （co-toxicity coefficient，CTC）;根据 CTC 值评判两种药剂的联合毒力作用：CTC 值大于120为增效作用，小于80为拮抗作用，80～120为相加作用。
2 结果与分析
2.1 多杀霉素和茚虫威对草地贪夜蛾的毒力
由表1可知，多杀霉素对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力较高，LD50为5.41 μg/g，茚虫威对草地贪夜蛾的毒力比多杀霉素低，LD50为17.74 μg/g。另外多杀霉素对草地贪夜蛾幼虫的毒力回归线的斜率值高达17.64。表明采自安徽黄山地区的草地贪夜蛾种群中不同个体对多杀霉素的敏感性差异较小，极敏感的个体和耐药性强的个体都比较少。
2.2 多杀霉素和茚虫威不同比例混配对草地贪夜蛾的毒力
由表2可知，多杀霉素和茚虫威以不同比例混配对草地贪夜蛾的毒力不同。两者在质量比1∶9～9∶1的范围内混配，具有相加作用或者增效作用，其中多杀霉素∶茚虫威=1∶9时增效作用最大，共毒系数为147.3。
3 讨论
茚虫威以触杀和胃毒作用为主，对鳞翅目害虫具有卓越的杀虫活性且对非靶标生物安全。研究发现，对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂产生抗性的草地贪夜蛾田间种群对茚虫威无交互抗性[11]。因此茚虫威是一种防治草地贪夜蛾的理想药剂。
目前，国内对于农药复配的增效作用主要采用共毒系数法进行评价。本研究在测定多杀霉素和茚虫威两种单剂对草地贪夜蛾毒力的基础上，研究了多杀霉素和茚虫威对草地贪夜蛾的联合毒力作用。结果表明，多杀霉素对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力回归方程的斜率值高达17.64，表明采自安徽黄山地区的草地贪夜蛾种群中不同个体对多杀霉素的敏感性差异较小，极敏感的个体和耐药性强的个体都比较少。另外多杀霉素和茚虫威以一定的比例复配后对草地贪夜蛾幼虫具有相加或增效作用。其中，当多杀霉素与茚虫威的质量比为1∶9时增效作用最显著，共毒系数为147.3。
据报道，茚虫威与其他杀虫剂复配可取得良好的防治效果。如通过室内毒力测定发现茚虫威与阿维菌素混配对稻纵卷叶螟具有一定的增效作用且12% 阿维·茚虫威可湿性粉剂在田间对稻纵卷叶螟具有较好的速效性和持效性[12];茚虫威与氯虫苯甲酰胺混配对甜菜夜蛾也具有明显增效作用[13]。本研究将多杀霉素与茚虫威混配，不仅可以提高对草地贪夜蛾的防治效果，还可以延缓草地贪夜蛾抗药性的产生和发展，结果对于开发具有增效作用的杀虫剂混剂、提高对草地贪夜蛾的化学防治效果具有一定参考价值。
参考文献
[1] 姜玉英， 刘杰， 朱晓明. 草地贪夜蛾侵入我国的发生动态和未来趋势分析[J]. 中国植保导刊， 2019， 39（2）： 33-35.
[2] 姜玉英，刘杰， 谢茂昌， 等. 2019年我国草地贪夜蛾扩散为害规律观测[J].植物保护，2019，45（6）：10-19.
[3] 崔志斌， 李智群， 王勇，等. 草地贪夜蛾研究现状及防控策略[J]. 湖南农业科学， 2020 （4）： 38-42.
[4] 李富根， 艾国民， 李友顺， 等. 茚虫威的作用机制与抗性研究进展[J]. 农药， 2013， 52（8）： 558-560.
[5] 陈伟国， 戴建忠， 林蔚红， 等. 茚虫威及其复配剂对家蚕的毒性和安全性评价[J]. 蚕桑通报， 2018， 49（2）： 28-32.
[6] 丁宁， 孟庆伟， 赵伟杰， 等. 噁二嗪类杀虫剂茚虫威的研究进展[J]. 农药学学报， 2005， 7（2）： 97-103.
[7] 柴洪新， 史大昕， 张奇， 等. 多杀菌素的研究进展[J]. 化工进展， 2011， 30（S2）： 239-243.
[8] WATSON G B. Actions of insecticidal spinosyns on gamma-aminobutyric acid responses from small-diameter cockroach neurons [J]. Pesticide Biochemistry and Physiology， 2001， 71（1）： 20-26.
[9] IRAC （Insecticide Resistance Action Committee）. Susceptibility test methods series， Method No. 020 [R]. http：∥www. irac-online. org/.
[10]SUN Yunpei， JOHNSON E R. Analysis of joint action of insecticides against houseflies [J]. Journal of Economic Entomology， 1960， 53： 887-892.
[11]YU S J， MCCORD JR E. Lack of cross-resistance to indoxacarb in insecticide-resistant Spodoptera frugiperda （Lepidoptera： Noctuidae） and Plutella xylostella （Lepidoptera： Yponomeutidae） [J]. Pest Management Science， 2007， 63（1）： 63-67.
[12]朱成刚， 吉沐祥， 吴祥， 等. 阿维菌素与茚虫威混配对稻纵卷叶螟的毒力测定与田间药效[J]. 江苏农业科学， 2014（9）： 120-121.
[13]杨莹莹， 赖晓伊， 赖多， 等. 氯虫苯甲酰胺与茚虫威对甜菜夜蛾的混配增效作用[J]. 广东化工， 2017， 44（12）： 58-59.
（责任编辑：杨明丽）
关键词 草地贪夜蛾; 联合毒力; 茚虫威; 多杀霉素
中图分类号： S 482.3
文献标识码： B
DOI： 10.16688/j.zwbh.2020321
Abstract Spodoptera frugiperda （J.E.Smith） is one of the most important globally distributed agricultural pests which attack a wide range of crops including maize， sorghum and wheat. Since S.frugiperda invaded Yunnan province in January 2019， it has spread rapidly to most of provinces in China. Currently， spraying chemical insecticides is an important way to control S.frugiperda in China. To screen out the synergistic insecticide mixtures and delay the development of resistance， the joint action of insecticides spinosad and indoxacarb with different modes of action on insects was investigated in this paper. The LD50 values of spinosad and indoxacarb on S.frugiperda were 5.41 μg/g and 17.74 μg/g， respectively. The results showed that the mixtures of spinosad and indoxacarb with different ratios have addition or synergistic effect on S.frugiperda larvae， among which the mixtures at ratio of 1∶9 showed significant synergistic effect and the co-toxicity coefficient was 147.3.
Key words Spodoptera frugiperda; joint toxicity; indoxacarb; spinosad
草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）是一种原产于美洲热带和亚热带地区的毁灭性农业害虫，于2019 年初侵入我国云南普洱地区[1]，并扩散至全国26个省（区、市），主要为害玉米等农作物[2-3]。目前对于草地贪夜蛾的应急防控主要采用化学防治，但国内尚无登记用于防治该害虫的药剂，因此筛选高效安全的化学药剂及其增效组合对于延缓抗药性产生，提高防治效果及支持草地贪夜蛾的防治工作具有积极意义。
茚虫威是美国杜邦公司开发的新型噁二嗪类杀虫剂，进入害虫体内水解为去甲氧羰基代谢物DCJW，作用于害虫神经细胞中的钠离子通道，阻断神经冲动传导，导致昆虫全身僵硬而死亡[4-5]。茚虫威几乎对所有鳞翅目害虫，如棉铃虫 Helicoverpa armigera、小菜蛾 Plutella xylostella、烟青虫 Helicoverpa assulta、甜菜夜蛾 Spodoptera exigua、苹果蠹蛾 Carpocapsa pomonella等有效[6]。也是2019年和2020年农业农村部公布的《草地贪夜蛾应急防治用药推荐名单》中的单剂之一。多杀霉素是由陶氏益农公司开发的一种生物源大环内酯类杀虫剂，其兼具生物农药的安全性和化学农药的高效性，因此在国内农药市场上占据了一定份额[7-8]。因此，本研究将茚虫威这一推荐药剂与生物源杀虫剂多杀霉素进行复配，测定其联合毒力，旨在筛选出复配的最佳配比，为进一步提高对草地贪夜蛾的防效、延缓其抗药性发生和发展提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 供试昆虫
草地贪夜蛾于2019年5月采自安徽省黄山市黄山区玉米田，在实验室利用玉米叶饲养且不接触任何杀虫药剂。饲养条件为（26±1）℃，相对湿度为30%～60%，光周期L∥D=16 h∥8 h。成虫饲喂10%蜂蜜水，选取3龄初期幼虫进行毒力测定。
1.2 供试杀虫剂
99.0%茚虫威原药购自杜邦公司（上海）;950%多杀霉素原药购自美国陶氏益农公司。
1.3 两种单剂的毒力测定
采用国际杀虫剂抗药性行动委员会推荐的饲料混毒法[9]，用丙酮将2种待测杀虫剂稀释成5个浓度并均匀混入人工饲料中，分别是多杀霉素（4、4.5、5.2、6 μg/g和6.9 μg/g）、茚虫威（3.125、625、125、25 μg/g和50 μg/g），以混毒的饲料饲喂试虫，以添加丙酮的饲料为对照。在12孔培养板中分别加入足量饲料，并在每孔中接入 1 头 3 龄初期试虫，每个浓度至少处理 36 头试虫。置于（26±1）℃，相对湿度为30%～60%，光周期为 L∥D=16 h∥8 h的条件中饲养。48 h后统计各处理组幼虫死亡数量并采用PoloPlus 2.0 （LeOra Software， Petaluma， CA， USA）计算剂量-反应曲线的斜率值、卡方值、LD50 及其95%置信限。 1.4 两种药剂混配增效作用测定
分别将多杀霉素（A）和茚虫威（B）原药用适量丙酮溶解。然后A∶B 按 1∶9、2∶8、3∶7、4∶6、5∶5、6∶4、7∶3、8∶2、9∶1 进行混配。根据混剂的理论 LD50 将不同配比浓度稀释成5个浓度梯度，并设置空白对照，進行杀虫活性测定。最后根据测定结果得到不同配比混剂的LD50，并采用孙云沛法[10]计算不同混配药剂的共毒系数 （co-toxicity coefficient，CTC）;根据 CTC 值评判两种药剂的联合毒力作用：CTC 值大于120为增效作用，小于80为拮抗作用，80～120为相加作用。
2 结果与分析
2.1 多杀霉素和茚虫威对草地贪夜蛾的毒力
由表1可知，多杀霉素对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力较高，LD50为5.41 μg/g，茚虫威对草地贪夜蛾的毒力比多杀霉素低，LD50为17.74 μg/g。另外多杀霉素对草地贪夜蛾幼虫的毒力回归线的斜率值高达17.64。表明采自安徽黄山地区的草地贪夜蛾种群中不同个体对多杀霉素的敏感性差异较小，极敏感的个体和耐药性强的个体都比较少。
2.2 多杀霉素和茚虫威不同比例混配对草地贪夜蛾的毒力
由表2可知，多杀霉素和茚虫威以不同比例混配对草地贪夜蛾的毒力不同。两者在质量比1∶9～9∶1的范围内混配，具有相加作用或者增效作用，其中多杀霉素∶茚虫威=1∶9时增效作用最大，共毒系数为147.3。
3 讨论
茚虫威以触杀和胃毒作用为主，对鳞翅目害虫具有卓越的杀虫活性且对非靶标生物安全。研究发现，对氨基甲酸酯类和有机磷类杀虫剂产生抗性的草地贪夜蛾田间种群对茚虫威无交互抗性[11]。因此茚虫威是一种防治草地贪夜蛾的理想药剂。
目前，国内对于农药复配的增效作用主要采用共毒系数法进行评价。本研究在测定多杀霉素和茚虫威两种单剂对草地贪夜蛾毒力的基础上，研究了多杀霉素和茚虫威对草地贪夜蛾的联合毒力作用。结果表明，多杀霉素对草地贪夜蛾3龄幼虫的毒力回归方程的斜率值高达17.64，表明采自安徽黄山地区的草地贪夜蛾种群中不同个体对多杀霉素的敏感性差异较小，极敏感的个体和耐药性强的个体都比较少。另外多杀霉素和茚虫威以一定的比例复配后对草地贪夜蛾幼虫具有相加或增效作用。其中，当多杀霉素与茚虫威的质量比为1∶9时增效作用最显著，共毒系数为147.3。
据报道，茚虫威与其他杀虫剂复配可取得良好的防治效果。如通过室内毒力测定发现茚虫威与阿维菌素混配对稻纵卷叶螟具有一定的增效作用且12% 阿维·茚虫威可湿性粉剂在田间对稻纵卷叶螟具有较好的速效性和持效性[12];茚虫威与氯虫苯甲酰胺混配对甜菜夜蛾也具有明显增效作用[13]。本研究将多杀霉素与茚虫威混配，不仅可以提高对草地贪夜蛾的防治效果，还可以延缓草地贪夜蛾抗药性的产生和发展，结果对于开发具有增效作用的杀虫剂混剂、提高对草地贪夜蛾的化学防治效果具有一定参考价值。
参考文献
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（责任编辑：杨明丽）