【摘 要】
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目的 研究肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系.方法 采用小鼠肝癌细胞系H22接种BALB/c小鼠,建立肝癌模型;采用流式细胞术方法检测CD4+CD25+T/CD4+T细胞
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目的 研究肝癌荷瘤小鼠调节性T细胞数量的改变及其与肿瘤生长的关系.方法 采用小鼠肝癌细胞系H22接种BALB/c小鼠,建立肝癌模型;采用流式细胞术方法检测CD4+CD25+T/CD4+T细胞的比例;以RT-PCR和流式细胞术检测Foxp3基因的表达.以免疫磁珠分选法纯化CD4+CD25+T和CD4+CD25-T细胞;在体外,用3H-TdR掺入法检测T细胞的增殖情况;在体内,观察荷瘤小鼠来源的CD4+CD25+T细胞对肿瘤生长的作用.结果 (1)荷瘤小鼠在引流淋巴结中,CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞(18.80%±0.06%)比例增高,与对照组(9.50%±0.03%)相比,差异有统计学意义(P＜0.01);在非引流淋巴结(LN)和脾脏(SP)中,荷瘤小鼠CD4+CD25+T/CD4+T比例分别为16.28%±0.02%和17.28%±0.06%,与对照组9.50%±0.03%和11.08%±0.04%相比,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05);同时,调节性T细胞特异性标志Foxp3 mRNA的表达也升高.在同一只荷瘤小鼠中,引流淋巴结中CD4+CD25+T细胞数量(18.8%±0.06%)较对侧非引流淋巴结(16.28%±0.02%)略有升高,但差异无统计学意义(P＞0.05).(2)从荷瘤小鼠中纯化的CD4+CD25+T细胞,在体外对抗CD3单抗的刺激无反应,但能抑制CD4+CD25-T细胞的增殖.(3)CD4+CD25+T/CD4+T比例与肿瘤大小呈正相关,并且可以抑制CD4+CD25-T细胞的抗肿瘤效应.结论 肝癌细胞在小鼠体内的生长可以提高调节性T细胞的数量,其数量的高低与肿瘤的大小呈正相关,提示清除调节性T细胞将是肿瘤免疫治疗的策略之一.
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