重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)转染牙龈成纤维细胞的瞬时表达检测

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目的检测重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)对人牙龈成纤维细胞的转染效率及瞬时表达.方法人牙龈成纤维细胞体外原代培养并传代,重组质粒用脂质体包裹介导进行体外转染.双抗体夹心ELISA法对重组质粒在人牙龈成纤维细胞中表达产物的含量进行检测.结果人可溶性肿瘤坏死因子受体[sTNFR(p55)]在基因转染24h后开始表达,72 h最高,转染组细胞培养液和冻融液中sTNFR(p55)表达量均高于对照组(P<0.05),1周后表达逐渐减弱,2周后仍有少量表达.结论重组质粒pcDNA3/sTNFR(p55)在人牙龈成纤维细胞系中具有表达功能,并且在细胞外及细胞内均具有特异性表达产物.
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