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摘要：对阿司达莫缓释片主要成分双嘧达莫的释放度进行研究，采用篮法100转/分钟，0.1mol/L盐酸溶液900ml为溶剂，第2小时后弃去酸液，加入pH值6.8缓冲液与乙醇按6：4混合的溶液作为溶剂，按外标法以峰面积计算每片在不同时间的释放量，在第2h、4h、10h的释放总量应分别为标示量的20～50%、40～70%和75%以上。
关键词：阿司达莫缓释片 双嘧达莫 释放度 HPLC法
中图分类号：Q575+.6
人体胃的排空时间大约为2h，故前2h选择0.1mol/L盐酸溶液作为溶剂，后更换人体模拟肠道环境（pH值4.0～6.8）的溶出介质。由于肠道的，我们选择pH值在此范围的缓冲盐作溶剂进行释放度考察。
1.试验仪器与试药：
1.1仪器 高效液相色谱仪HITACHI UV-VIS Detector L-7420、Pump L-7110、Autosampler L-7200；色谱柱：Diamonsil C18 5μ 200×4.6mm；ZRS-8C智能溶出试验仪 天津大学无线电厂；RC-6D 溶出度测试仪 天津市国铭医药设备有限公司
1.2试剂及试药 阿司达莫缓释片：哈药集团世一堂制药厂，批号：080601；双嘧达莫对照品中国药品生物制品检定所；甲醇（色谱级）；其他试剂均为分析纯，水为纯化水。
2.方法与结果
2.1色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 5μ 200×4.6mm； 流动相：0.05%磷酸二氢钾溶液（三乙胺调pH为6，再加磷酸调pH至3.5）-甲醇（50：50）；检测波长为235nm；进样量为20μl；理论板数按双嘧达莫峰计算应不低于2000。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备 精密称取双嘧达莫对照品约40mg置10ml量瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液适量，超声15分钟，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取1ml置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；
2.2.2溶出液的制备 取本品，照释放度测定法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅹ D第一法），采用溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅹ C）第一法装置，转速为每分钟100转，以0.1mol/L盐酸溶液900ml为溶剂，依法操作，经0.5h、2h分别取溶液5ml滤过，并同时补充等体积等温度的0.1mol/L盐酸溶液。在第2h取样后，弃去酸液，立即加入预热恒温的pH值6.8缓冲液与乙醇按6：4混合好的溶出液（取0.1mol/L盐酸溶液和0.2mol/L磷酸钠溶液，按3：1混合均匀，即得pH值6.8缓冲液，再与乙醇按6：4混合，即得）900ml为溶剂，于4h、10h分别各取溶液5ml滤过，并同时补充等体积等温度的混合溶出液。本品每片中阿司匹林在0.5小时的释放量均应为标示量的75%以上（阿司匹林测定，本文不进行研究），双嘧达莫在第2h、4h、10h的释放总量应分别为标示量的20～50%、40～70%和75%以上。
2.2.3阴性溶液的制备 取不含阿司匹林和双嘧达莫的制剂辅料，按照处方工艺制成不含主药的阴性样品，按释放度测定方法操作，制成空白辅料供试液。结果表明在本液相色谱条件下，制剂辅料在阿司匹林和双嘧达莫主峰出现处无色谱峰出现，不干扰测定。
2.3 线性试验 取双嘧达莫对照品11.5mg，置25ml量瓶中，加pH值6.8缓冲液和乙醇以6：4比例混合的溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml、3ml、5ml、7ml、10ml，分别置5个10ml量瓶中，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，分别取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以样品浓度（μg/ml）为横坐标，以色谱峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，线性方程Y=52407x-151185 r=0.99997，双嘧达莫浓度在46μg/ml～460μg/ml范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。
2..4仪器精密度 取0.2305mg/ml双嘧达莫对照品溶液，在同一条件下重复测定5次的RSD%为0.176，结果表明本仪器的精密度良好。
2. 5 溶液稳定性 取阿司达莫缓释片细粉适量，加混合溶出液溶解制成每1ml约含双嘧达莫0.22mg/ml的溶液，摇匀，过滤，取续滤液分别在0、1、2、4、6、8、10、12小时进样20μl，各测定值的RSD（%）为1.51 ，结果表明测定液在12小时内稳定。
2.6 回收率试验 取双嘧达莫对照品约相当于取样量的10%（取对照品约11mg置500ml量瓶中）、20%（取对照品约11mg置250ml量瓶中）、40%（取对照品约9mg置100ml量瓶中）、60%（取对照品约13mg置100ml量瓶中）各三份，精密称定，并分别加入处方比例的辅料，用pH值6.8缓冲液和乙醇以6：4的比例混合的溶出液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。结果回收率为99.0%，RSD%为 0.49。
2.7 中间精密度试验 取阿司达莫缓释片，按照拟定的释放度检查方法，采用两台溶出仪测定，结果2h、4h、10h的RSD%分别为1.52、1.51、0.90。
2..8 均一性试验 取片重相近的阿司达莫缓释片6片，按照拟定的释放度检查方法，分别于1h、2h（0.1mol/L盐酸溶液）、4h、6h、8h、10h、12h（混合溶液）各取溶液5ml滤过，按外标法以峰面积计算每片在不同时间的释放量，结果表明阿司达莫缓释片释放度均一性试验良好。
四、讨论
1.片子易粘附于溶出杯底部，为了更换溶出液方便和防止个别片子被冲起，悬浮并随溶出液旋转，导致各溶出杯的测量结果产生较大偏差，故采用篮法100转，而不采用桨法50转。
2.双嘧达莫是弱碱性药物，在pH4.3醋酸盐缓冲液和pH5.8、pH6.8的磷酸盐缓冲溶液中检测均不合格，过滤时滤膜上附有黄色物质，可能是双嘧达莫在溶液中过饱和，重新析出，以致于最大释药量仅有5%以下。用三羟基甲基氨基甲烷（pH6.0）、邻苯二甲酸氢钾（pH5.6）作溶出液，有溶剂峰干扰检测。
3.双嘧达莫易溶于稀酸，溶于乙醇，不溶于水和碱液，溶解度受pH值影响非常大。考察在pH6.8缓冲液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠和吐温-80，释放度也达不到要求，还出现保留时间依次变化、柱效逐渐降低的现象。
4.因溶出液中加入乙醇，考察乙醇挥发对实验的影响，结果溶液仅减少1%左右，在误差允许范围内，可以忽略不计。
参考文献
[1]刘茜等 阿司达莫缓释片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度，中国临床药理学杂志，2007，23（2）：113-117
[2]中国药典2010年版二部
关键词：阿司达莫缓释片 双嘧达莫 释放度 HPLC法
中图分类号：Q575+.6
人体胃的排空时间大约为2h，故前2h选择0.1mol/L盐酸溶液作为溶剂，后更换人体模拟肠道环境（pH值4.0～6.8）的溶出介质。由于肠道的，我们选择pH值在此范围的缓冲盐作溶剂进行释放度考察。
1.试验仪器与试药：
1.1仪器 高效液相色谱仪HITACHI UV-VIS Detector L-7420、Pump L-7110、Autosampler L-7200；色谱柱：Diamonsil C18 5μ 200×4.6mm；ZRS-8C智能溶出试验仪 天津大学无线电厂；RC-6D 溶出度测试仪 天津市国铭医药设备有限公司
1.2试剂及试药 阿司达莫缓释片：哈药集团世一堂制药厂，批号：080601；双嘧达莫对照品中国药品生物制品检定所；甲醇（色谱级）；其他试剂均为分析纯，水为纯化水。
2.方法与结果
2.1色谱条件：色谱柱：Diamonsil C18 5μ 200×4.6mm； 流动相：0.05%磷酸二氢钾溶液（三乙胺调pH为6，再加磷酸调pH至3.5）-甲醇（50：50）；检测波长为235nm；进样量为20μl；理论板数按双嘧达莫峰计算应不低于2000。
2.2溶液的制备
2.2.1对照品溶液的制备 精密称取双嘧达莫对照品约40mg置10ml量瓶中，加入0.1mol/L盐酸溶液适量，超声15分钟，用0.1mol/L盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取1ml置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液；
2.2.2溶出液的制备 取本品，照释放度测定法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅹ D第一法），采用溶出度测定法（《中国药典》2010年版二部附录Ⅹ C）第一法装置，转速为每分钟100转，以0.1mol/L盐酸溶液900ml为溶剂，依法操作，经0.5h、2h分别取溶液5ml滤过，并同时补充等体积等温度的0.1mol/L盐酸溶液。在第2h取样后，弃去酸液，立即加入预热恒温的pH值6.8缓冲液与乙醇按6：4混合好的溶出液（取0.1mol/L盐酸溶液和0.2mol/L磷酸钠溶液，按3：1混合均匀，即得pH值6.8缓冲液，再与乙醇按6：4混合，即得）900ml为溶剂，于4h、10h分别各取溶液5ml滤过，并同时补充等体积等温度的混合溶出液。本品每片中阿司匹林在0.5小时的释放量均应为标示量的75%以上（阿司匹林测定，本文不进行研究），双嘧达莫在第2h、4h、10h的释放总量应分别为标示量的20～50%、40～70%和75%以上。
2.2.3阴性溶液的制备 取不含阿司匹林和双嘧达莫的制剂辅料，按照处方工艺制成不含主药的阴性样品，按释放度测定方法操作，制成空白辅料供试液。结果表明在本液相色谱条件下，制剂辅料在阿司匹林和双嘧达莫主峰出现处无色谱峰出现，不干扰测定。
2.3 线性试验 取双嘧达莫对照品11.5mg，置25ml量瓶中，加pH值6.8缓冲液和乙醇以6：4比例混合的溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml、3ml、5ml、7ml、10ml，分别置5个10ml量瓶中，用上述溶液稀释至刻度，摇匀，分别取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图。以样品浓度（μg/ml）为横坐标，以色谱峰面积（A）为纵坐标进行线性回归，线性方程Y=52407x-151185 r=0.99997，双嘧达莫浓度在46μg/ml～460μg/ml范围内，峰面积与浓度呈良好的线性关系。
2..4仪器精密度 取0.2305mg/ml双嘧达莫对照品溶液，在同一条件下重复测定5次的RSD%为0.176，结果表明本仪器的精密度良好。
2. 5 溶液稳定性 取阿司达莫缓释片细粉适量，加混合溶出液溶解制成每1ml约含双嘧达莫0.22mg/ml的溶液，摇匀，过滤，取续滤液分别在0、1、2、4、6、8、10、12小时进样20μl，各测定值的RSD（%）为1.51 ，结果表明测定液在12小时内稳定。
2.6 回收率试验 取双嘧达莫对照品约相当于取样量的10%（取对照品约11mg置500ml量瓶中）、20%（取对照品约11mg置250ml量瓶中）、40%（取对照品约9mg置100ml量瓶中）、60%（取对照品约13mg置100ml量瓶中）各三份，精密称定，并分别加入处方比例的辅料，用pH值6.8缓冲液和乙醇以6：4的比例混合的溶出液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。结果回收率为99.0%，RSD%为 0.49。
2.7 中间精密度试验 取阿司达莫缓释片，按照拟定的释放度检查方法，采用两台溶出仪测定，结果2h、4h、10h的RSD%分别为1.52、1.51、0.90。
2..8 均一性试验 取片重相近的阿司达莫缓释片6片，按照拟定的释放度检查方法，分别于1h、2h（0.1mol/L盐酸溶液）、4h、6h、8h、10h、12h（混合溶液）各取溶液5ml滤过，按外标法以峰面积计算每片在不同时间的释放量，结果表明阿司达莫缓释片释放度均一性试验良好。
四、讨论
1.片子易粘附于溶出杯底部，为了更换溶出液方便和防止个别片子被冲起，悬浮并随溶出液旋转，导致各溶出杯的测量结果产生较大偏差，故采用篮法100转，而不采用桨法50转。
2.双嘧达莫是弱碱性药物，在pH4.3醋酸盐缓冲液和pH5.8、pH6.8的磷酸盐缓冲溶液中检测均不合格，过滤时滤膜上附有黄色物质，可能是双嘧达莫在溶液中过饱和，重新析出，以致于最大释药量仅有5%以下。用三羟基甲基氨基甲烷（pH6.0）、邻苯二甲酸氢钾（pH5.6）作溶出液，有溶剂峰干扰检测。
3.双嘧达莫易溶于稀酸，溶于乙醇，不溶于水和碱液，溶解度受pH值影响非常大。考察在pH6.8缓冲液中加入表面活性剂十二烷基硫酸钠和吐温-80，释放度也达不到要求，还出现保留时间依次变化、柱效逐渐降低的现象。
4.因溶出液中加入乙醇，考察乙醇挥发对实验的影响，结果溶液仅减少1%左右，在误差允许范围内，可以忽略不计。
参考文献
[1]刘茜等 阿司达莫缓释片在健康人体的药代动力学和相对生物利用度，中国临床药理学杂志，2007，23（2）：113-117
[2]中国药典2010年版二部