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探讨通过下调微小RNA(miRNA，miR)-146b-5p促进人甲状腺乳头状癌细胞(TPC-1)自噬功能对其增殖功能的影响。
方法脂质体法瞬时转染，实验分为4组：as-miR组(miR-146b-5p inhibitor)、as-NC组、共转染组(as-miR-146b-5p＋siBeclin1)和共转染对照组(as-miR-146b-5p＋siNC)。倒置荧光显微镜和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染效率。Western blot和RT-qPCR检测转染后各组TPC-1细胞中Beclin1蛋白、mRNA的表达。透射电镜观察转染后各组TPC-1细胞中自噬小体的变化。细胞计数试剂盒(CCK-8)法和平板克隆形成实验检测转染后各组TPC-1细胞增殖能力变化。
结果与as-NC组比较，转染24 h后as-miR组TPC-1细胞中miR-146b-5p表达下调为0.380±0.021，且Beclin1在蛋白和mRNA水平分别上调为0.612±0.014、0.413±0.005，电镜显示自噬小体明显增多，72 h的吸光度值下降为1.470±0.062(P＝0.007)，单个细胞克隆形成率降低为(29.000±3.610)%(P＝0.031)，差异均有统计学意义。与共转染对照组比较，转染36 h后共转染组TPC-1细胞中Beclin1在蛋白和mRNA水平分别下调为0.286±0.027、0.265±0.025，电镜显示自噬小体明显减少，72 h的吸光度值上升为2.564±0.050(P＝0.006)，单个细胞克隆形成率升高为(49.000±2.821)%(P＝0.027)。
结论下调miR-146b-5p通过增强自噬抑制TPC-1细胞的增殖能力。