H9N2型禽流感病毒核蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

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目的:利用大肠杆菌表达H9N2禽流感病毒(AIV)核蛋白(NP)与GST的融合蛋白并分离纯化,进行动物免疫制备多克隆抗体。方法:根据AIVNP基因序列设计引物,将已经获得的NP基因定向克隆到GST融合原核表达载体pGEX-KG并转化大肠杆菌,在IPTG诱导下获得高效表达。经谷胱甘肽层析柱分离纯化蛋白,制备抗原免疫家兔,得到pGEX—KG-NP多克隆抗体。结果:SDS—PAGE分析显示融合表达蛋白GST-NP相对分子质量约82000,表达量约占菌体总蛋白的20%。Western—blot和ELISA检测结果
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