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[摘 要]应用繁殖新技术可以增加奶牛的牛群数量和奶牛产奶量，加快育种进程。同情发情是指在人为控制下使奶牛在一定时间内集中发情，以便有计划地合理组织配种。本试验利用三种外源激素，孕马血清促性腺激素（PMSG）、垂体促卵泡素 （FSH）和孕酮栓+PG （CIDR），分别对青年母牛和经产母牛进行同期发情处理，研究三种外源激素对母牛同期发情的效果；同时研究发情后不同输精时间对受胎率的影响。结果表明采用三种外源激素进行同期发情处理，均获得了较高的同期发情率，用PMSG处理效果较好，三组青年母牛的同期发情率（78%、82%、90%）均分别高于三组经产母牛的发情率（76%、78%、86%）。青年母牛最佳输精时间为发情结束后10-12h，而经产母牛最佳输精时间为发情结束后13-15h。
[关键词]奶牛；外源激素；同期发情；输精时间；受胎率
中图分类号：TU264+.1 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）40-0095-02
[Abstract]Application of new animal reproduction technologies can dramatically increase the dairy population and milk production， and speed up breeding process. Estrus synchronization refers to the technology that manipulates the estrus period and makes the animal ovulation in a certain period of time. On current study， we applied three kinds of exogenous hormones， PMSG， FSH and CIDR， on different stages of dairy， to evaluate the effects of these hormones on the estrus synchronization. We also compared the effects of different artificial insemination time on the conception rate. The results showed that application of these three hormones could realize estrus synchronization. PMSG possessed a better effect compared with other two hormones. Estrus synchronization rate in young dairy was higher than in other groups. The optical insemination time was 10-12h after the end of estrus for young dairy， and 13-15h for parturition dairy.
[Key words]Dairy； exogenous hormone； estrus synchronization； artificial insemination； conception rate.
同期发情又称同步发情，是指通过某些外源激素处理，人为地控制并调整家畜在预定的一定时间内集中发情并正常排卵的一种技术。应用该技术可提高受胎率，缩短产仔间隔[1]。
鉴于该技术的重要性，国内外研究机构和科学家对牛、羊等家畜的同期发情开展了深入的研究。1997年，Z.Z. Xu等人研究了前列腺素（PGF2α）与孕酮（Progesterone）对奶牛同期发情与繁殖性能的影响[2]，结果表明PGF2α与Progesterone可以起到很好的同情发情效果。2008年，Titi H. H等人研究了孕马血清促性腺激素（GnRH）、Progesterone、PGF2a组合使用对绵羊和山羊同期发情的影响[3]。在国内，张永刚等人在2006年研究了GnRH诱导受体羊同期发情效果试验[4]，韩志强等人在2009年研究了CIDR与GnRH诱导绵羊同期发情效果比较[5]。
奶牛同期发情以后，要进行人工授精。母牛最佳的输精时间既减少了工作人员的工作量，又提高母牛受胎率，牛群的繁殖率，提高奶牛产奶量。
本试验比较了三种同期发情方案对青年牛和经产牛的同情发情效果，旨在优化同情发情方案，为下一步人工授精效果的提升提供基础。同时，研究发情结束后最适输精时间，为提高奶牛繁殖效率提供依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
于天津市武清区奶牛场，随机选择健康，膘情中等以上的荷斯坦奶牛，青年牛和经产牛各50头，体重350kg以上。经产母牛选择子宫正常，无生殖道疾病，经直肠检查空怀，在卵巢上有周期性黄体或陈旧黄体，排除了卵泡囊肿疾病和7d内有新的黄体生成的可能性。
1.1.2 药品和器械
药品：PMSG含量1000单位/支，FSH规格100单位/支，CIDR，每支含孕酮1.38g，PG用氯前列烯醇钠，（2ml）/支，购自天津市生物药业有限公司；
器械：一次性注射器50支，0.25ml凯苏式不锈钢输精枪10支，恒温水浴锅一个。
1.2 试验方法
1.2.1 同期发情
将青年牛和经产牛采用完全随机设计分成4组，分别为对照组和FSH、CIDR、PMSG。其中，对照组为不进行任何药物处理。试验一组采用肌肉注射 200 单位/次FSH（垂体促卵泡素）处理。试验二组用高锰酸钾溶液清洗母牛外阴后，将CIDR放入阴道深部，7d后撤拴，在撤拴处理前1d，肌肉注射氯前列腺醇钠0.4mg。试验三组采用肌肉注射 2000 单位/次PMSG处理。 1.2.2 发情鉴定
试验牛在同期发情药物处理后24h内开始观察发情表现。发情的母牛表现出外阴部红肿，阴道黏膜和子宫颈充血水肿，子宫颈口松开，有黏液流出，可以看到黏液分泌物的结痂等症状为依据。
1.2.3 人工输精
将发情的青年母牛和成年母牛随机分成3组。将同一批次的冻精在37℃下解冻10-15s，解冻后精液活力应该在0.3以上，并在30min内使用。第一组输精时间为发情结束后10-12h，输精 1次；第二组输精时间为发情结束后13-15h，输精1次；第三组输精时间为发情结束后16-18h，输精1次。
1.2.4 数据分析和处理
本试验采用完全随机设计。试验数据的整理及方差分析采用SAS9.0进行。采用Duncan法进行多重比较，p<0.05视为显著。
2. 结果与分析
2.1 不同处理方法对青年母牛和经产母牛同期发情效果的比较
从表1可以看出，三种同期发情的处理方法均取得了较高的同期发情率，极显著性高于对照组（P<0.01）。采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理的效果差异不显著（P>0.05）。采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理后，三组青年母牛的同期发情率（78%、82%、90%）均高于三组经产母牛的发情率（76%、78%、86%）。
2.2 不同输精时间对受胎率的影响
从表2可以看出，3个情期输精后3组青年母牛的总受胎率分别为92.68%、88.09%、83.33%。第1个情期输精的受胎率分别为70.73%、66.67%和61.90%；Ⅰ组的总受胎率显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组（p<0.05）。第一组第1情期受胎率显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，分别高出4.06和8.83个百分点（P<0.05）。
从表3可以看出，3个情期输精后3组经产母牛的总受胎率分别为为87.80%、90.48%、85.71%。第1个情期输精的受胎率分别为53.65%、59.52%和52.38%；试验Ⅱ组3个情期的总受胎率显著高于第二组与第三组（p<0.05），分别高出2.68和 4.29个百分点。试验Ⅱ组的第1情期受胎率最高，Ⅰ组和Ⅲ组高5.87和7.14 个百分点。不同输精时间3组总受胎率差异不显著（P>0.05）。
3.讨论
母牛的发情伴随着卵泡的发育、成熟、雌激素产生和排卵。母牛体内的生殖激素控制着母牛发情，为人工利用外源激素，控制母牛发情周期，使所有母牛在一定时间内同期发情成为可能[6]。
本试验采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理青年牛和经产牛。结果表明，三种方法处理母牛后的同期发情率差异不显著（P>0.05），都可以取得良好的同情效果。
采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理后，三组青年母牛的同期发情率（78%、82%、90%）均分别高于三组经产母牛的发情率（76%、78%、86%），这可能是因为经产母牛的生殖系统受过损伤或注射过类似药物，导致经产母牛对药物不如青年母牛敏感。
人工授精中，牛奶的受胎率在很大程度上受输精时间的影响。输精过早，在卵子排出的时候精子已经死亡。反过来，输精延迟时会导致在卵子已经老化时仍无法完成授精，受精发育形成胚胎几率几乎为零。
从表2和3可以看出，不同的配种时间对青年母牛和经产母牛的情期受胎率影响很大。青年母牛发情后 10-12h 输精，3个情期的总受胎率最高。经产母牛发情后13-15h输精的总受胎率最高。
4.结论
采用三种外源激素处理，诱导牛奶同期发情是行之有效的，生产中可以任选其中一种或配合使用。青年母牛最佳配种时间为发情后10-12h，而成年母牛最佳配种时间为发情后13-15h。母牛最佳的输精时间的确立对受胎率的提高及牛场的经济效益的改善均有重要意义。
参考文献
[1] 王锋主编. 动物繁殖学[M]. 中国农业大学出版社，北京，2012.5.
[2] Z.Z. Xu， et al， Reproductive performance of lactating dairy cows following estrus synchronization regimens with PGF2α and progesterone [J]. Theriogenology， 1997， Vol. 47 （3）， pp. 687-701.
[3] Titi H H， et al.， Estrus synchronization in sheep and goats using combinations of GnRH， progestagen and prostaglandin F2alpha [J]. Reproduction in Domestic Animals， 2008， Vol. 45 （4）， pp. 594-9.
[4] 张永刚，彭学波，杨光.孕马血清促性腺激素诱导受体羊同期发情效果[J].贵州畜牧兽医.2006 （01）.
[5] 韩志强，张洪涛，孙晓玉，刘光前，乔丽霞，梁坤.CIDR与GNRH诱导同期发情效果比较 [J].中国乳业.2009（10）
[6] Mortimer R G， et al.， PGF2a in dairy cows [J]. Theriogenology， 1984， 21： 869.
[关键词]奶牛；外源激素；同期发情；输精时间；受胎率
中图分类号：TU264+.1 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）40-0095-02
[Abstract]Application of new animal reproduction technologies can dramatically increase the dairy population and milk production， and speed up breeding process. Estrus synchronization refers to the technology that manipulates the estrus period and makes the animal ovulation in a certain period of time. On current study， we applied three kinds of exogenous hormones， PMSG， FSH and CIDR， on different stages of dairy， to evaluate the effects of these hormones on the estrus synchronization. We also compared the effects of different artificial insemination time on the conception rate. The results showed that application of these three hormones could realize estrus synchronization. PMSG possessed a better effect compared with other two hormones. Estrus synchronization rate in young dairy was higher than in other groups. The optical insemination time was 10-12h after the end of estrus for young dairy， and 13-15h for parturition dairy.
[Key words]Dairy； exogenous hormone； estrus synchronization； artificial insemination； conception rate.
同期发情又称同步发情，是指通过某些外源激素处理，人为地控制并调整家畜在预定的一定时间内集中发情并正常排卵的一种技术。应用该技术可提高受胎率，缩短产仔间隔[1]。
鉴于该技术的重要性，国内外研究机构和科学家对牛、羊等家畜的同期发情开展了深入的研究。1997年，Z.Z. Xu等人研究了前列腺素（PGF2α）与孕酮（Progesterone）对奶牛同期发情与繁殖性能的影响[2]，结果表明PGF2α与Progesterone可以起到很好的同情发情效果。2008年，Titi H. H等人研究了孕马血清促性腺激素（GnRH）、Progesterone、PGF2a组合使用对绵羊和山羊同期发情的影响[3]。在国内，张永刚等人在2006年研究了GnRH诱导受体羊同期发情效果试验[4]，韩志强等人在2009年研究了CIDR与GnRH诱导绵羊同期发情效果比较[5]。
奶牛同期发情以后，要进行人工授精。母牛最佳的输精时间既减少了工作人员的工作量，又提高母牛受胎率，牛群的繁殖率，提高奶牛产奶量。
本试验比较了三种同期发情方案对青年牛和经产牛的同情发情效果，旨在优化同情发情方案，为下一步人工授精效果的提升提供基础。同时，研究发情结束后最适输精时间，为提高奶牛繁殖效率提供依据。
1 材料和方法
1.1 试验材料
1.1.1 试验动物
于天津市武清区奶牛场，随机选择健康，膘情中等以上的荷斯坦奶牛，青年牛和经产牛各50头，体重350kg以上。经产母牛选择子宫正常，无生殖道疾病，经直肠检查空怀，在卵巢上有周期性黄体或陈旧黄体，排除了卵泡囊肿疾病和7d内有新的黄体生成的可能性。
1.1.2 药品和器械
药品：PMSG含量1000单位/支，FSH规格100单位/支，CIDR，每支含孕酮1.38g，PG用氯前列烯醇钠，（2ml）/支，购自天津市生物药业有限公司；
器械：一次性注射器50支，0.25ml凯苏式不锈钢输精枪10支，恒温水浴锅一个。
1.2 试验方法
1.2.1 同期发情
将青年牛和经产牛采用完全随机设计分成4组，分别为对照组和FSH、CIDR、PMSG。其中，对照组为不进行任何药物处理。试验一组采用肌肉注射 200 单位/次FSH（垂体促卵泡素）处理。试验二组用高锰酸钾溶液清洗母牛外阴后，将CIDR放入阴道深部，7d后撤拴，在撤拴处理前1d，肌肉注射氯前列腺醇钠0.4mg。试验三组采用肌肉注射 2000 单位/次PMSG处理。 1.2.2 发情鉴定
试验牛在同期发情药物处理后24h内开始观察发情表现。发情的母牛表现出外阴部红肿，阴道黏膜和子宫颈充血水肿，子宫颈口松开，有黏液流出，可以看到黏液分泌物的结痂等症状为依据。
1.2.3 人工输精
将发情的青年母牛和成年母牛随机分成3组。将同一批次的冻精在37℃下解冻10-15s，解冻后精液活力应该在0.3以上，并在30min内使用。第一组输精时间为发情结束后10-12h，输精 1次；第二组输精时间为发情结束后13-15h，输精1次；第三组输精时间为发情结束后16-18h，输精1次。
1.2.4 数据分析和处理
本试验采用完全随机设计。试验数据的整理及方差分析采用SAS9.0进行。采用Duncan法进行多重比较，p<0.05视为显著。
2. 结果与分析
2.1 不同处理方法对青年母牛和经产母牛同期发情效果的比较
从表1可以看出，三种同期发情的处理方法均取得了较高的同期发情率，极显著性高于对照组（P<0.01）。采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理的效果差异不显著（P>0.05）。采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理后，三组青年母牛的同期发情率（78%、82%、90%）均高于三组经产母牛的发情率（76%、78%、86%）。
2.2 不同输精时间对受胎率的影响
从表2可以看出，3个情期输精后3组青年母牛的总受胎率分别为92.68%、88.09%、83.33%。第1个情期输精的受胎率分别为70.73%、66.67%和61.90%；Ⅰ组的总受胎率显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组（p<0.05）。第一组第1情期受胎率显著高于试验Ⅱ组和试验Ⅲ组，分别高出4.06和8.83个百分点（P<0.05）。
从表3可以看出，3个情期输精后3组经产母牛的总受胎率分别为为87.80%、90.48%、85.71%。第1个情期输精的受胎率分别为53.65%、59.52%和52.38%；试验Ⅱ组3个情期的总受胎率显著高于第二组与第三组（p<0.05），分别高出2.68和 4.29个百分点。试验Ⅱ组的第1情期受胎率最高，Ⅰ组和Ⅲ组高5.87和7.14 个百分点。不同输精时间3组总受胎率差异不显著（P>0.05）。
3.讨论
母牛的发情伴随着卵泡的发育、成熟、雌激素产生和排卵。母牛体内的生殖激素控制着母牛发情，为人工利用外源激素，控制母牛发情周期，使所有母牛在一定时间内同期发情成为可能[6]。
本试验采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理青年牛和经产牛。结果表明，三种方法处理母牛后的同期发情率差异不显著（P>0.05），都可以取得良好的同情效果。
采用FSH、CIDR、PMSG三种同期发情方法处理后，三组青年母牛的同期发情率（78%、82%、90%）均分别高于三组经产母牛的发情率（76%、78%、86%），这可能是因为经产母牛的生殖系统受过损伤或注射过类似药物，导致经产母牛对药物不如青年母牛敏感。
人工授精中，牛奶的受胎率在很大程度上受输精时间的影响。输精过早，在卵子排出的时候精子已经死亡。反过来，输精延迟时会导致在卵子已经老化时仍无法完成授精，受精发育形成胚胎几率几乎为零。
从表2和3可以看出，不同的配种时间对青年母牛和经产母牛的情期受胎率影响很大。青年母牛发情后 10-12h 输精，3个情期的总受胎率最高。经产母牛发情后13-15h输精的总受胎率最高。
4.结论
采用三种外源激素处理，诱导牛奶同期发情是行之有效的，生产中可以任选其中一种或配合使用。青年母牛最佳配种时间为发情后10-12h，而成年母牛最佳配种时间为发情后13-15h。母牛最佳的输精时间的确立对受胎率的提高及牛场的经济效益的改善均有重要意义。
参考文献
[1] 王锋主编. 动物繁殖学[M]. 中国农业大学出版社，北京，2012.5.
[2] Z.Z. Xu， et al， Reproductive performance of lactating dairy cows following estrus synchronization regimens with PGF2α and progesterone [J]. Theriogenology， 1997， Vol. 47 （3）， pp. 687-701.
[3] Titi H H， et al.， Estrus synchronization in sheep and goats using combinations of GnRH， progestagen and prostaglandin F2alpha [J]. Reproduction in Domestic Animals， 2008， Vol. 45 （4）， pp. 594-9.
[4] 张永刚，彭学波，杨光.孕马血清促性腺激素诱导受体羊同期发情效果[J].贵州畜牧兽医.2006 （01）.
[5] 韩志强，张洪涛，孙晓玉，刘光前，乔丽霞，梁坤.CIDR与GNRH诱导同期发情效果比较 [J].中国乳业.2009（10）
[6] Mortimer R G， et al.， PGF2a in dairy cows [J]. Theriogenology， 1984， 21： 869.