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摘 要 目的:探讨慢性阻塞性肺病COPD患者气道内炎症细胞组成及血清CRP、TN-α水平的变化及其在急性加重期中的作用。方法:检测例COPD急性加重期患者及6例稳定期患者和6例健康对照组的诱导痰液中细胞组成;采用酶联免疫吸附法EISA检测所有试验者的TN-α和CRP水平分析上述指标的变化和关系。结果:COPD急性加重期与稳定期患者诱导痰细胞均以中性粒细胞为主稳定期患者中性粒细胞计数下降但仍高于健康对照组;AECOPD组患者的TN-α和CRP水平明显高于稳定期和健康对照组稳定期COPD患者的TN-α和CRP水平明显高于健康对照组;AECOPD组诱导痰的中性粒细胞百分比与TN-α和CRP水平呈正相关。结论:COPD急性加重期与稳定期患者的诱导痰中性粒细胞增多与COPD气道炎症反应持续存在有关;COPD患者体内存在TN-α和CRP持续高表达提示COPD患者存在持续的气道炎症反应。
关键词 COPD 痰诱导 细胞分类 炎症因子
资料与方法
COPD组:8年5月~9年月COPD患者58例。其中急性加重期组例男1例女11例平均年龄655±78岁;稳定期组6例其中男1例女1例平均年龄68±85岁。COPD诊断按照中华医学会呼吸病学会制定的《慢性阻塞性肺病诊治指南7年修订版》的标准。均有胸部X线胸片、肺功能、血常规检查。
对照组:选择同期健康体检者6例男15例女11例平均年龄66±56岁与COPD组无差异并且排除可能导致CRP、TN-α升高的疾病同时要求戒烟个月以上。
方法:①诱导痰的采集及处理: 根据曾勉等[1]的方法雾化吸入%高渗盐水分钟此后每分钟深咳1次共分钟收集的痰液量至少1g以上。置于恒温水浴振荡箱振荡15分钟5r/分离心分钟沉淀细胞作痰液质量检查上清液待测。②血清CRP、TN-α血标本的制作和检测方法:所有受试者经禁食及无吸氧1小时后采静脉血ml。采用化学发光免疫法测定高灵敏度血清CRP水平TN-α的测定应用BIOSOURCE试剂盒应用EISA 法分别检测其含量操作按试剂盒说明书进行。③肺功能检测:所有COPD组均行肺功能测试。选择第1秒用力呼气容积占预计值的百分比EV1%和第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值EV1/VC作为肺功能测试指标。
统计学处理:各项数据均以均数±标准差X±S表示两组以上样本资料采用单因素方差分析其中两两比较用SN-q检验两因素相关分析用Pearson直线相关分析检验水准α=5。用SPSS1统计软件包处理数据。
结 果
健康对照组的体重显著高于COPD组,健康对照组的吸烟指数显著低于COPD组,性别、年龄、身高两组比较差异没有统计学意义。见表1。
各组诱导痰液的细胞分类情况:COPD组痰细胞总数增高分类以中性粒细胞为主;健康对照组诱导痰细胞分类中以巨噬细胞为主中性粒细胞占7±85%。
AECOPD组患者血浆CRP和TN-α水平显著高于稳定期组血浆水平和健康对照组血浆水平P<5;稳定期组显著高于健康对照组血浆水平P<5。
诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平的相关性: COPD组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平皆呈显著正相关;痰中巨噬细胞计数与血浆CRP和TN-α水平皆呈显著负相关。健康对照组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平无相关性r=1P>5。
讨 论
COPD是一种气流受限为特征的疾病导致COPD急性加重最主要原因为小气道和肺实质的炎症,中性粒细胞和CRP、TN-α在气道局部炎症中起重要作用[1]。
诱导痰技术[]在COPD应用中的安全性和可行性已得到证实是一种简便可靠的新方法。哮喘患者诱导痰中以嗜酸性粒细胞和巨噬细胞为主而COPD患者诱导痰中则以中性粒细胞为主[]。
本实验研究了COPD患者诱导痰的细胞成分及比例和血清炎症因子变化的关系证明了COPD患者的急性加重与气道内的中性粒细胞浸润有关并可以导致血清炎症因子CRP、TN-α水平升高。同时COPD稳定期患者的气道内仍然存在中性粒细胞的浸润和血清炎症因子CRP、TN-α水平升高提示在稳定期的COPD依然存在着气道内的局部炎症反应而这种炎症是导致COPD患者的全身炎症反应的原因之一并可能是导致消瘦等全身慢性炎症反应的症状的原因。从而证实诱导痰技术和血清炎症因子CRP、TN-α水平的监测对于研究COPD病情变化和全身炎症反应具有重要意义。
关键词 COPD 痰诱导 细胞分类 炎症因子
资料与方法
COPD组:8年5月~9年月COPD患者58例。其中急性加重期组例男1例女11例平均年龄655±78岁;稳定期组6例其中男1例女1例平均年龄68±85岁。COPD诊断按照中华医学会呼吸病学会制定的《慢性阻塞性肺病诊治指南7年修订版》的标准。均有胸部X线胸片、肺功能、血常规检查。
对照组:选择同期健康体检者6例男15例女11例平均年龄66±56岁与COPD组无差异并且排除可能导致CRP、TN-α升高的疾病同时要求戒烟个月以上。
方法:①诱导痰的采集及处理: 根据曾勉等[1]的方法雾化吸入%高渗盐水分钟此后每分钟深咳1次共分钟收集的痰液量至少1g以上。置于恒温水浴振荡箱振荡15分钟5r/分离心分钟沉淀细胞作痰液质量检查上清液待测。②血清CRP、TN-α血标本的制作和检测方法:所有受试者经禁食及无吸氧1小时后采静脉血ml。采用化学发光免疫法测定高灵敏度血清CRP水平TN-α的测定应用BIOSOURCE试剂盒应用EISA 法分别检测其含量操作按试剂盒说明书进行。③肺功能检测:所有COPD组均行肺功能测试。选择第1秒用力呼气容积占预计值的百分比EV1%和第1秒用力呼气容积与用力肺活量比值EV1/VC作为肺功能测试指标。
统计学处理:各项数据均以均数±标准差X±S表示两组以上样本资料采用单因素方差分析其中两两比较用SN-q检验两因素相关分析用Pearson直线相关分析检验水准α=5。用SPSS1统计软件包处理数据。
结 果
健康对照组的体重显著高于COPD组,健康对照组的吸烟指数显著低于COPD组,性别、年龄、身高两组比较差异没有统计学意义。见表1。
各组诱导痰液的细胞分类情况:COPD组痰细胞总数增高分类以中性粒细胞为主;健康对照组诱导痰细胞分类中以巨噬细胞为主中性粒细胞占7±85%。
AECOPD组患者血浆CRP和TN-α水平显著高于稳定期组血浆水平和健康对照组血浆水平P<5;稳定期组显著高于健康对照组血浆水平P<5。
诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平的相关性: COPD组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平皆呈显著正相关;痰中巨噬细胞计数与血浆CRP和TN-α水平皆呈显著负相关。健康对照组患者诱导痰中中性粒细胞计数与血浆CRP和TN-α水平无相关性r=1P>5。
讨 论
COPD是一种气流受限为特征的疾病导致COPD急性加重最主要原因为小气道和肺实质的炎症,中性粒细胞和CRP、TN-α在气道局部炎症中起重要作用[1]。
诱导痰技术[]在COPD应用中的安全性和可行性已得到证实是一种简便可靠的新方法。哮喘患者诱导痰中以嗜酸性粒细胞和巨噬细胞为主而COPD患者诱导痰中则以中性粒细胞为主[]。
本实验研究了COPD患者诱导痰的细胞成分及比例和血清炎症因子变化的关系证明了COPD患者的急性加重与气道内的中性粒细胞浸润有关并可以导致血清炎症因子CRP、TN-α水平升高。同时COPD稳定期患者的气道内仍然存在中性粒细胞的浸润和血清炎症因子CRP、TN-α水平升高提示在稳定期的COPD依然存在着气道内的局部炎症反应而这种炎症是导致COPD患者的全身炎症反应的原因之一并可能是导致消瘦等全身慢性炎症反应的症状的原因。从而证实诱导痰技术和血清炎症因子CRP、TN-α水平的监测对于研究COPD病情变化和全身炎症反应具有重要意义。