【摘 要】
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目的:建立凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测T细胞激活后核因子κB(NF-κB)活性的方法。方法:人外周血单个核细胞(PBMC)用抗CD3单克隆抗体(mAB)激活T细胞后,提取细胞核蛋白与
【机 构】
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蚌埠医学院免疫学教研室;安徽省感染与免疫重点实验室(蚌埠医学院)
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(3070721)
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目的:建立凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测T细胞激活后核因子κB(NF-κB)活性的方法。方法:人外周血单个核细胞(PBMC)用抗CD3单克隆抗体(mAB)激活T细胞后,提取细胞核蛋白与生物素标记的NF-κB特异性探针结合,通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,转移至正电荷尼龙膜,加链霉亲和素辣根过氧化物酶和化学发光底物后用x光胶片显影,检测NF-κB活性。结果:人PBMC用抗CD3mAB刺激后15min,明显可见NF-κB活化,30min时达高峰,60min时降低。结论:EMSA化学发光法检测转
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