【摘 要】
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目的观察黄酒是否能改善同型半胱氨酸(Hcy)诱导的内皮祖细胞(EPC)功能。方法抽取大鼠骨髓,用密度梯度离心法从骨髓细胞悬液中获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的
【机 构】
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绍兴市人民医院心内科浙江大学绍兴医院心内科,浙江中医药大学
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目的观察黄酒是否能改善同型半胱氨酸(Hcy)诱导的内皮祖细胞(EPC)功能。方法抽取大鼠骨髓,用密度梯度离心法从骨髓细胞悬液中获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,诱导单个核细胞向内皮祖细胞分化,收集贴壁细胞用于实验。激光共聚焦显微镜鉴定Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双染色阳性细胞被认定是正在分化的EPC,流式细胞计数进一步鉴定。通过MTT法检测细胞活性以及考虑人体病理生理浓度选取Hcy最佳干预浓度和时间。每种酒(0%、0.2%、0.4%、0.8%、1.6%)与300μmol/L Hcy共同孵育EPC 24 h,MTT法检测酒类对细胞活性的影响,确定最佳干预浓度后分为对照组、Hcy组、Hcy+黄酒组、Hcy+红酒组和Hcy+酒精组,培养24 h后收集样品,采用Western blot、NO试剂盒分别观察EPC的e NOS、p-e NOS功能和NO水平。结果Hcy组e NOS、p-e NOS的生成量较对照组降低(P<0.01),Hcy+黄酒组和Hcy+红酒组较Hcy组能明显改善e NOS、p-e NOS的生成量(P<0.01),Hcy+酒精组较Hcy组没有明显的变化(P>0.05)。Hcy组NO水平较对照组降低(P<0.001),Hcy+黄酒组和Hcy+红酒组较Hcy组能明显改善NO的生成量(P<0.001),Hcy+黄酒组优于Hcy+红酒组(P<0.001),并且两者还明显优于Hcy+酒精组(P<0.001),Hcy+酒精组较Hcy组没有明显的变化(P>0.05)。结论 Hcy能显著减弱EPC的e NOS、p-e NOS和NO生成量,小剂量的黄酒和红葡萄酒均能改善EPC的上述功能。
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