表达新型冠状病毒奥密克戎BA.1变异株S1基因重组DNA疫苗的构建及免疫原性

来源 :中国兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:caonima_0720
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旨在构建以S1蛋白为基础的新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)奥密克戎BA.1变异株(Omicron-BA.1)DNA疫苗并研究其免疫原性。首先,以真核表达载体pSN为骨架,使用PCR和无缝克隆方法构建含Omicron-BA.1变异株S1基因的pSN-S1重组质粒。使用无内毒素质粒大提试剂盒大量提取pSN-S1重组质粒,通过Western blot方法验证S1蛋白的表达。用pSN-S1重组质粒免疫C57BL/6小鼠后,使用ELISA方法检测小鼠血清针对S1蛋白的特异性IgG抗体效价及亚型。结果显示,pSN-S1重组质粒构建成功,S1蛋白表达良好,条带单一、大小正确。实验室制备的pSN-S1重组质粒的质量浓度(2 168.2 mg/L)和纯度(D260/D280=1.92)较高,可用于后续小鼠免疫试验。pSN-S1重组质粒在C57BL/6小鼠中具有良好的免疫原性,第3次免疫后21 d,针对S1蛋白的特异性IgG抗体效价平均可达1∶1 200,主要偏向于IgG2a亚型。本研究成功构建了以S1蛋白为基础的SARS-CoV-2 Omicron-BA.1变异株DNA候选疫苗,为针对SARS-CoV-2 Omicron变异株DNA疫苗的进一步研究奠定了基础。
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