【摘 要】
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目的 探究miR-141靶向KELCH样ECH关联蛋白-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1（Keap1-Nrf2/HO-1）信号通路调控脑缺血再灌注（IR）后的炎症反应及保护神经元功能的作用机制。方法 60只大鼠随机分为sham组、IR组、agomirNC组、miR-141组；agomir-NC组、miR-141组大鼠侧脑室注射agomir NC、miR-141 agomir,sham组、IR
【基金项目】
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云南省康复临床医学中心（zx2019-04-02）；
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目的 探究miR-141靶向KELCH样ECH关联蛋白-核因子E2相关因子2/血红素加氧酶-1（Keap1-Nrf2/HO-1）信号通路调控脑缺血再灌注（IR）后的炎症反应及保护神经元功能的作用机制。方法 60只大鼠随机分为sham组、IR组、agomirNC组、miR-141组；agomir-NC组、miR-141组大鼠侧脑室注射agomir NC、miR-141 agomir,sham组、IR组注射等体积生理盐水。用大脑中动脉栓塞（MCAO）构建IR模型，sham组只插线不结扎。72 h后行神经功能学评分；TTC染色、TUNEL染色检测脑梗死体积和细胞凋亡；ELISA法、qRT-PCR、Western blot检测IL-1β、IL-6、TNF-α、miR-141、Keap1、Nrf2、HO-1、NLRP3水平。同时将体外培养并转染的小胶质细胞BV-2分为control组、OGD组、agomir-NC组、miR-141组、miR-141+pcDNA3.1-NC组、miR-141+Keap1组；糖氧剥夺（OGD）法建立IR细胞模型。TargetScanHuman预测及双荧光素酶报告验证miR-141对Keap1的靶向调控关系；MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法测定BV-2细胞增殖、凋亡能力；再次应用ELISA法、qRT-PCR、Western blot检测白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、TNF-α、miR-141、Keap1、Nrf2、HO-1、NLRP3水平。结果 过表达miR-141可促进IR大鼠神经功能恢复，减少脑梗死体积和细胞凋亡，降低IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3水平，升高Nrf2、HO-1水平。BV-2细胞中miR-141能够负向调控Keap1表达，过表达miR-141抑制Keap1-Nrf2/HO-1信号通路，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，并下调IL-1β、IL-6、TNF-α、NLRP3的表达。结论 miR-141能够靶向调控Keap1-Nrf2/HO-1信号通路，减轻IR的炎症反应，限制小胶质细胞激活，保护神经元。
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