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目的
探讨脱氧胆酸诱导食管鳞状上皮细胞肠化生过程中,Krüppel样转录因子(KLF)5对绒毛蛋白的调节作用。
方法采用免疫组织化学法检测KLF5和绒毛蛋白在人正常食管鳞状上皮组织(20份)、反流性食管炎组织(59份)、Barrett食管组织(21份)中的表达;使用HET-1A细胞,分别用脱氧胆酸处理2、4、8、12 h,KLF5 RNA干扰(小干扰RNA)下调和慢病毒过表达KLF5后,PCR、蛋白质印迹法检测其KLF5、绒毛蛋白mRNA及其蛋白质的表达。计数资料采用卡方检验比较,计量资料采用配对t检验分析比较。
结果免疫组织化学法显示,KLF5、绒毛蛋白在正常食管黏膜未见表达,在食管炎组织呈部分弱表达[分别为27.1%(16/59)和20.3%(12/59)],而在Barrett食管组织中表达明显增强[分别为85.7%(18/21)和100.0%(21/21),差异均有统计学意义(χ2=36.576、56.765, P均<0.01)]。200 μmol/L脱氧胆酸分别处理HET-1A细胞2 h后,与未加脱氧胆酸的对照组(0 h)相比,KLF5、绒毛蛋白mRNA(t=-16.64, -11.85)及其蛋白质(t=-30.80, -20.70)表达量增加(P均<0.01)。采用RNA干扰技术下调KLF5表达可阻止胆酸诱导的绒毛蛋白表达,采用基因转染技术上调KLF5表达后,可同时上调绒毛蛋白在HET-1A细胞中的表达。
结论在胆酸介导的食管鳞状上皮细胞肠化生过程中,KLF5对绒毛蛋白表达具有调节作用,可能参与Barrett食管的发生。