【摘 要】
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目的将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞中,观察其对SMMC-7721细胞生物学行为的影响。方法采用脂质体法将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞株中,潮霉素筛选4周
【机 构】
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南方医科大学附属中山市博爱医院产前诊断中心,
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目的将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞中,观察其对SMMC-7721细胞生物学行为的影响。方法采用脂质体法将构建好的UBE2C干扰质粒转入SMMC-7721细胞株中,潮霉素筛选4周,并经Western blot鉴定,选出干扰效果最佳的低表达稳定株(shUBE2C组)用于后续实验。用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,软琼脂克隆形成实验检测克隆形成能力。结果 Western blot检测显示,转shUBE2C组UBE2C的蛋白表达水平低于转阴性对照shNC组(P<0.05)。shUBE2C组的SMMC-7721细胞生长曲线明显右移,显示靶向抑制UBE2C可降低SMMC-7721细胞的增殖能力。与shNC组相比,shUBE2C组细胞的G1期细胞比例明显增高(P﹤0.05),而S期的比例明显降低(P﹤0.05),提示其延缓细胞周期进程。shUBE2C组的克隆形成率明显低于shNC组(P﹤0.05),提示其降低克隆形成能力。结论 UBE2C低表达可改变SMMC-7721细胞的生物学行为。
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