【摘 要】
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转基因技术的出现成功实现了将目的基因插入到实验动物的基因序列中,这为研究疾病的分子机理提供了极其有用的工具.转基因小鼠模型是通过显微注射的方法将DNA(目的基因)注射
【机 构】
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中国科学院上海高等研究院,干细胞和纳米医学研究中心,动物疾病模型实验室;
【基金项目】
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中国科学院“百人计划”(2006-067);国家自然科学基金(40872168)资助
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转基因技术的出现成功实现了将目的基因插入到实验动物的基因序列中,这为研究疾病的分子机理提供了极其有用的工具.转基因小鼠模型是通过显微注射的方法将DNA(目的基因)注射入原核内,这种典型的技术在遗传学界已经广泛应用了30年.然而,这种传统的转基因技术缺乏精确定位:DNA片段被随机地、多拷贝地插入,形成连环体;插入的DNA片段易发生突变;或因为插入位点的限制,发生位置效应,使得目的基因的表达不稳定,甚至不表达.以上种种现象导致了在应用随机转基因技术的时候,需要获得多个原代鼠,以筛选符合实验设计的转基因表型.目前,通过在目的基因两侧插入绝缘子序列可以保护转入的基因不受周围调控因子影响,这种方法可以部分解决随机转基因技术带来的位置效应问题.同时,细菌载体大片段DNA(<300 kb)也可以减少位置效应的发生.然而,动物携带多拷贝的大片段基因可能造成不可预计的表型.根据现有的研究结果,目前最有效的解决位置效应的方法是将目的基因插入到特定基因位点,即靶向转基因,如目前快速定点的转基因技术TARGATTTM.本文将当前构建靶向转基因动物模型的各种技术进行了解析和评估.
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