【摘 要】
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为了分离出热稳定性胞外菊粉酶产生菌,并使菊粉酶的生产、产酶最大化以及分析其酶学性质,进行了本实验.实验结果表明:1株产外切β-D-果糖转化酶的点青霉从菊芋生长的环境中被
【机 构】
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浙江大学食品科学与营养系,杭州,310029
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为了分离出热稳定性胞外菊粉酶产生菌,并使菊粉酶的生产、产酶最大化以及分析其酶学性质,进行了本实验.实验结果表明:1株产外切β-D-果糖转化酶的点青霉从菊芋生长的环境中被分离,并经过诱变命名为点青霉(Penicillium notatum)MH1.采用半部分因子设计和中心组合设计对影响菊粉酶生产的培养基组成中主要因子进行了优化,得到一最优培养基组成(g/L):菊芋粉 24,牛肉膏 5,酵母膏 1,豆饼粉 1,KH2PO4 3,MgSO4·7H2O 0.2,初始pH 3.5.优化试验结果显示:在34℃、200 r/min摇床转速下培养48 h,采用优化的培养基发酵生产得到的最大菊粉酶活力为32.46 U/mL.对酶的部分性质进行了研究,其最适pH为4.2,酶在pH 3～7具有反应活性,最适作用温度为55℃.粗酶液经过硫酸铵分级盐析,其适宜的盐析饱和度为20%～58%,盐析后酶液通过DEAE-纤维素DE52和Sephdex G-100柱层析,纯化后得到的酶采用SDS-PAGE检测分析,结果显示该酶的分子质量为(108±1)KDa.
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