布鲁菌外膜蛋白OMP10表达及其抗原性的研究

来源 :动物医学进展 | 被引量 : 0次 | 上传用户:duanxinyu0056
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设计1对特异性引物对羊布鲁菌16M总DNA进行外膜蛋白ompl0的PCR扩增,得到了一个大小为330bp的目的基因片段(去掉17个氨基酸编码的信号肽),测序证实它与国外报道的羊布鲁菌omp10基因完全一致。将其克隆到表达载体PET-30a中,经酶切、PCR扩增和测序分析,表明重组表达载体构建成功。将此重组质粒转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,该基因以包涵体的形式在大肠埃希菌中表达,经过包涵体的变性、复性和亲和层析纯化,成功获得大小为14.2ku的融合蛋白,与理论推测的蛋白分子质量一致
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