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目的
探讨泛素样含PHD和环指域蛋白1( Ubiquitin like PHD and ring finger domain 1,UHRF1)与肺腺癌的作用及其潜在的作用机制。
方法通过生物信息方法检测UHRF1在肺腺癌中的表达。实时定量PCR及免疫蛋白印记检测UHRF1在肺腺癌细胞中的表达。MTT实验,Ki67染色和克隆形成方法检测正常组,阴性对照组低表达UHRF1组肺腺癌细胞系A549活性的变化。通过免疫蛋白印记的方法检测增殖相关蛋白PCNA,Rb,CDK4/6的变化,以及Wnt/β-catenin信号通路中经典蛋白β-catenin以及GSK-3β的变化。
结果UHRF1在肺腺癌中相对于癌旁组织表达升高(P<0.05)。在肺腺癌细胞系(A549和H1299)相对于16HBE表达上调(P<0.05)。MTT法和克隆形成实验表明敲除UHRF1能够降低A549细胞生长效率(P<0.05)。Ki-67免疫荧光染色显示沉默UHRF1后A549细胞增殖能力下降(P<0.05)。此外,沉默UHRF1导致PCNA CDK4/6表达相对于对照组明显降低,而Rb蛋白相对于对照组表达升高(P<0.05)。沉默UHRF1抑制能够使β-catenin的蛋白相对于对照组表达下调,GSK-3β的蛋白相对于对照组表达上调(均P值<0.05)。
结论UHRF1基因在非小细胞肺癌尤其是肺腺癌中具有重要作用,UHRF1可能是一个潜在预防、治疗的肺腺癌的一个重要因子。