【摘 要】
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采用细胞松弛素B(CB)处理结合蔗糖梯度超速离心方法分离柑橘和金柑亚原生质体的结果表明,柑橘和金柑原生质体的直径为20~30μm,采用蔗糖梯度超速离心分离亚原生质体,其适宜离心力是
【机 构】
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华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室
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采用细胞松弛素B(CB)处理结合蔗糖梯度超速离心方法分离柑橘和金柑亚原生质体的结果表明,柑橘和金柑原生质体的直径为20~30μm,采用蔗糖梯度超速离心分离亚原生质体,其适宜离心力是1400000xg;4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)的染色效果最好,细胞核和细胞质可明显区分;愈伤组织经CB处理36h后再分离亚原生质体,可显著提高微原生质体的产量,分离的微原生质体直径为1.8~3.5μm,产量达到2-3×10^4个·g^-1(FW)。
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